NY_T 2014—2011 柑橘类水果及制品中橙皮苷、柚皮苷含量的测定.docVIP

中华人民共和国农业行业标准 NY/T 2014—2011 柑橘类水果及制品中 Determination of hesperidin and naringin in citrus fruits and derived products 2011-09-01 发布 2011-12-01实施前 言 本标准按照GB／T 1.12009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司提出。 本标准由全国果品标准化技术委员会(SAC／TC 501)归口。 本标准起草单位：中国农业科学院柑橘研究所、农业部柑橘及苗木质量监督检验测试中心。 本标准主要起草人：焦必宁、赵其阳、王成秋、苏学素、付陈梅。柑橘类水果及制品中橙皮苷、柚皮苷含量的测定 1 范围 本标准规定了柑橘类水果及其制品中橙皮苷和柚皮苷含量的液相色谱测定方法。 本标准适用于柑橘类水果及其制品中橙皮苷和柚皮苷含量的测定。 本标准定量测定范围：橙皮苷和柚皮苷均为1.0 mg／L～200 mg／L。 本标准定量限：橙皮苷和柚皮苷均为1 mg／kg。 本标准检出限：橙皮苷和柚皮苷均为0.3 mg／kg。 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB／T 6682分析实验室用水规格和试验方法 试料中的橙皮苷和柚皮苷经有机溶剂热提取，微孔滤膜过滤，高效液相色谱法测定，外标法定量。 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB／T 6682规定的一级水。 甲醇(CH3H，CAS号67 - 56 -1)，色谱纯。 二甲基甲酰胺 [(CH3)2NCOH，CAS号1968 -12 -2]。 乙酸溶液 [体积分数Ψ (CH3COOH) =]：量取5 mL乙酸，定容至1000 mL。 乙酸溶液 [c(CH3COOH) =0.01 mol／L]：称取0.600 5 g乙酸，定容至1 000 mL。 草酸铵溶液 {(NH4)2C2O4·H201= 0.025 mol／L）：称取3.552 8 g草酸铵，定容至1000 mL。 橙皮苷标准品 (CAS号520 - 26 - 3，纯度大于99. 0%)。 柚皮苷标准品 (CAS号10236 - 47 -2，纯度大于99. 0%)。 橙皮苷和柚皮苷标准储备溶液：分别称取120 mg (精确到0.1 mg)的橙皮苷和柚皮苷标准品溶于 20 mL二甲基甲酰胺中，用乙酸溶液(4.4) 定容至100 mL，配制成质量浓度为1 200 mg／L的标准储备 液。于20℃冰箱中贮存。 高效液相色谱仪：带紫外检测器(UV)。 分析天平：感量0.01 g和0.000 1g。 组织捣碎机。 水浴锅。 滤膜：0.45 dum，水相。 6.1.1 果实样品，取可食部分按四分法缩分后将其切碎，放入组织捣碎机中匀浆后取样。 果酱、果汁及饮料样品，充分混匀后直接取样。 罐头样品，按四分法进行缩分后，放入组织捣碎机中匀浆后取样。 果脯蜜饯类，按四分法进行缩分后，将其切碎充分混匀后取样。 平行称取两份试料每份试料10 g（精确到0.01 g）于50 mL容量瓶中加入10 mL草酸铵溶液，然后加入10 mL二甲基甲酰胺均匀混合加水定容后将其倒100 mL锥形瓶中，置入90℃水浴锅中保持10 min，冷却至室温后，取上清液，经滤膜(5.5)过滤，得到待测液。 色谱柱：C色谱柱(粒度5 μm，4.6 mm250 mm)或同等性能的色谱柱。 流动相：乙酸溶液(4.3)甲醇 = 6535。 柱温：35℃。 流速：0.80 mL／min。 进样量：10 μL。 检测波长：283 nm。 取标准储备溶液用乙酸溶液 (4.4) 和二甲基甲酰胺（二者体积比为82）稀释配成质量浓度为 1 mg／L、5 mg／L、10 mg／L、15 mg／L、30 mg／L、60 mg／L、120 mg／L的标准工作溶液，按6.3进行 测定(色谱图参见附录A)。以橙皮苷和柚皮苷质量浓度为横坐标，相应的积分峰面积为纵坐标，计算标准曲线或求线性回归方程。 做两份试料的平行测定。取10 μL待测液和相应的标准工作溶液顺序进样，以保留时间定性，以色谱峰面积积分值定量，试样溶液中橙皮苷和柚皮苷响应值均应在定量测定范围之内。 除不加试样外，均按上述步骤进行操作。 试样中橙皮苷或柚皮苷的含量以质量分数计，单位以毫克每千克(mg／kg)计，按式