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临床微生物学标本采集处理操作规范 检验科细菌室 标本正确采集的重要性 ●正确的采取处理与运送对于细菌培养的标本是临床细菌检验成功的关键 ●标本采取与处理的规范化是准确、及时地向临床提供重要的临床感染信息的基础 ●标本采取与处理不符合要求，则细菌培养的结果毫无意义。 ●为推行检验方法的标准化，我国借鉴国外部分经验已成立中国临床实验室标准化委员会(CLSI)，临床实验室的认证工作已经开始准备。微生物检验的标准化首先应从标本采取与处理的规范化开始。 ●全面的检验保证系统更加重视分析前与分析后的因素对检验结果质量的影响，是微生物检验分析前质量控制的主要内容之一，即是对标本采取与处理的质量保证。 分以下单元 血液细菌培养标本的采集和处理 下呼吸道分泌物(痰) 标本采取与质量要求 尿液细菌培养标本的采集与运送 粪便标本微生物学检查质量要求 分泌物标本送检规范 厌氧菌标本送检规范 一、血液细菌培养标本的采集和处理 ●临床上疑为败血症、脓毒血症或其他 血流感染的患者，做血液细菌培养以明确 病原菌。 ●及时、准确地从患者血液中分离出病原菌，才能正确实施有效地抗菌治疗，从而有助于治愈率的提高和医疗费用的降低。 1．采血时机：在患者发热期间越早越好，最好在抗菌治疗前，以正在发冷发热时或发冷发热前半小时为宜。 2．采血次数及间隔：在急性发热性疾病如脑膜炎、细菌性肺炎，需马上做抗菌治疗；或急性骨髓炎、化脓性关节炎等要紧急手术的患者，应立即从两臂分别取2份标本。 ●感染性心内膜炎患者，24h内要 取血3次，每次间隔不少于 30min，必要时次日再做血培养2次。 ●发热原因不明者两次抽血间隔时间60min；必要时于24～48h后再抽血2次。 ●据国外统计 1次血培养可检出菌血症的80％ 2次血培养检出90％ 3次血培养检出99％ ●国内统计 17家医院1次血培养阳性率10.8％ 18家医院2次以上血培养阳性率14.8％ 3．采血部位： ●多次采血应在不同部位的血管穿刺以排除皮肤菌丛污染的可能。 ●要避免从血管插管内取血，因插管常被污染其培养结果不能反映真实情况。 ●在不同部位取血，2次分离出同样菌种才是确定病原菌的有力证据。 4．采血量： ● 成人菌血症或败血症的血液中含菌量较少，平均1～3ml血液中仅有1个细菌。采血量一定要足。 ●比例约为增菌肉汤的1：5~1：10为宜。 成人采血8～10ml 儿童采血3～5ml 婴幼儿采血1～2ml 骨髓培养一般接种量为1～2ml 采血量过少影响病原菌的检出，过多可因血中含有抗体，抗生素浓度过浓而不利于细菌的生长。 特殊的全身性和局部感染患者采血培养的建议： ①可疑急性原发性菌血症、真菌菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎，应在不同部位采集2～3份血标本。 ②不明原因发热，如隐性脓肿、 伤寒热和波浪热，先采集2～3 份血标本，24～36 h后估计体 温升高之前（通常在下午）再 采集2份以上。 ③可疑菌血症或真菌菌血症，但 血培养持续阴性，应改变血培 养方法，以获得罕见的或苛养 的微生物。 ④ 入院前两周内接受抗菌药物治疗 患者，连续三天，每天采集2份 选用可中和或吸附抗菌药物的 培养基。 必要时做L型菌，真菌和厌氧菌 培养。 5．培养瓶消毒程序 ①70%酒精擦拭血培养瓶橡皮塞，作用60s。 ②用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞子 表面残余酒精，然后注入血液。注入 血液培养基瓶内，迅速轻摇混合，防 止血液凝固，有利于病原菌的生长。 6．无菌操作： 无论采取何种方法，在血液培养的全过程，从皮肤消毒、标本采取、运送、分离移种等，皆应十分注意无菌操作。 用头皮针为新生儿和婴儿取血时，应更换针头再将血注入培养瓶中。 7．标本运送 ●采血后应该立即送检，如不能立即送检，需室温保存或置35℃～37℃孵箱中，切勿冷藏。 ●自动化连续监测系统虽有允许延迟上机监测微生物生长的原理，还是应该尽量减少延迟上机时间。 二、下呼吸道分泌物(痰培养)  标本采取与质量要求 对病原学诊断的重要作用 存在严重的问题-标本质量 病原学诊断和临床不符或脱节 造成抗菌药物的应用不合理