【化学工程与工艺专业】【毕业设计+开题报告+文献综述】耐尔蓝接技超支化合物用于DNA电化学传感器的研究.doc

（20 届） 毕业设计 耐尔蓝接技超支化合物用于DNA电化学传感器的研究 摘要：关键词：；；Abstract: A novel DNA electrochemchemical biosensor was prepared by the cysteine on the gold electrode surface, and link it to the hyperbranched poly-rich carboxyl, then add ssDNA-1 probe, combine ite N-terminal to carboxyl, using Nile Blue as an indicator, this DNA electrochemical biosensor was characterized by cyclic voltammetry and differential pulse method. The results indicated that the complementary DNA segement in the solution could be recognized and detected though measuring the peak current of Nile Blue that interacted with dsDNA. 朗读 显示对应的拉丁字符的拼音 ? 字典 Keywords：ybrid，yperbranched polymer，DNA electrochemical sensor 目 录 摘要 I Abstract II 1 绪论 1 1.1 引言 1 1.2 相关研究的最新成果及动态 1 2 实验方法 4 2.1 仪器和试剂 4 2.2 超支化合物修饰电极的制备 4 2.2.1 超支化合物的制备 5 2.2.2 超支化合物的活化 5 2.2.3 修饰电极制备 5 2.2.4 DNA探针的固定与杂交 5 2.2.5 电化学测定 5 3 结果与讨论 6 3.1 超支化合物表征 6 3.1.1 核磁共振氢谱表征 6 3.1.2 红外表征 6 3.2 实验条件优化 7 3.2.1 HBP与EDC+NHS混合液的体积比 7 3.2.2 杂交条件选择 8 3.3 不同浓度的目标DNA的检测 10 3.4 电极的稳定性 10 3.5 不同来源的DNA片段识别 11 4 结论 12 参考文献 13 致 谢 15 1 绪论 1.1 引言 DNA是一类重要的生命物质，是大多数生物体遗传信息的载体，对DNA的研究是生命科学领域中极为重要的内容，随着人类基因组计划的顺利实施，基于DNA探针的基因传感器、基因芯片的研究正成为基因组研究的一个热点，DNA传感器是用电化学手段选择性检测DNA的生物传感器，由已知的DNA片段和电活性指示剂构成[1]。利用电活性分子（杂交指示剂）来指示杂交前后信号变化，选择性地识别靶序列[2]。电化学DNA传感器与通常的标记（放射性同位素标记、荧光标记等）探针技术相比，不仅选择性好、灵敏度高、响应快、操作简单及价格低廉，而且有无可比你的分离纯化基因的功能，故可望用于临床快速检测基因疾病，探讨各种因素引起的DNA损伤程度和可能的突变机理以及DNA为作用靶的药物研究[3]。 正在研究和已经应用的DNA传感器主要包括压电式传感器、化学发光(荧光)传感器、微组装免疫传感器、光学传感器以及电化学传感器等[4]。在DNA杂交及识别方面，电化学DNA传感器成本低，设计简单，设备小巧，能耗低，引起人们重视。通常，电化学DNA传感器是通过电极表面同载电化学指示剂标记的ssDNA来识别与之互补的目标DNA序列[5]。所使用的电化学指示剂是具有电化学活性的物质，通常使用二茂铁，还有邻苯二胺、阳离子金属复合物有机染料等[6]。但它们往往同时与ssDNA和dsDNA结合，选择性不理想。耐尔蓝用于生物染色，区别脂肪酸和中性脂肪，病理组织中细菌和放线菌染色等等方面效果较好，亦有作用为电化学指示剂的实际价值。 在本课题中，我们将自行合成的多羧基超支化合物修饰金电极，然后通过羧基基团与DNA的N端结合，在电极表面形成DNA单分子层，再与靶向DNA杂交并以耐尔蓝为指示剂，对DNA的固定杂交性能进行了研究。 1.2李毓琦25μl被检血清滴注于该膜上，经孵育与洗涤即可制得抗原与抗体复合物膜。用复合物膜组装成免疫电极．测定血清样品中乙型肝炎表面抗原古量。电极的线性范围是20~320ng/ml，方法的日间相对标准偏差为10.78%(n=4，m=5)105例临床血清样本，本法与酶联免疫吸附分析法测定结果符合率为86%。乙肝抗体膜片系一次