流式细胞平台新应用CBA流式液相芯片技术.pdfVIP

Gene Express 基因快讯2010年第2期 流式细胞平台新应用——CBA流式液相芯片技术 长期以来，科学工作者都希望能够从单个样本中 1. 轻松实现多重检测 一次检测多个目的蛋白，并且获得高精确度的结果。虽 最多可同时对一个样本中的72个目的蛋白进行精确定量。 然常规的蛋白分析方法很多，如ELISA 、Western等，但 2. 样本需要量小 是Western不能对蛋白精确定量，ELISA一次反应只检测 仅需要50μL溶液就可进行一次检测。 一个指标。如果检测多个指标，不仅要耗费大量样本， 3. 更高的灵敏度、更宽的检测范围和更好的重复性 而且需要分批操作，增加了不可控因素和较多的人为误 分析灵敏度高达2.8pg/mL，检测范围达0-5000pg/mL 。 差，从而导致组间差异增大，数据可靠性降低。在20世 4. 随心所欲的组合菜单—BD CBA Flex Set 纪90年代初，著名的生物技术公司BD就致力于一种单样 普通CBA kit只能固定检测6个指标，而最新的Flex Set最 本、多指标检测技术的研发，终于在上世纪末成功进入 多检测72个指标；种类涉及免疫、细胞信号转导、细胞凋亡 市场。这就是基于流式细胞检测平台的液相芯片，一种 等许多领域的蛋白定量分析。 多重蛋白定量技术——BD Cytometric Bead Array ，简称 5. 操作简单省时省力 CBA （图1）。 通过标准曲线定量蛋白浓度，整个流程只需要3.5h 。 6. 强大的软件分析系统 BD CBA软件可直接将目标蛋白的检测结果换算成标 准浓度。 二．CBA的应用 自CBA上市以来，越来越多的科研和临床研究人员 将CBA应用于他们的领域。CBA应用领域涉及眼泪、血 清、唾液、细胞培养上清等样本中细胞因子、炎症因子水 平的分析。CBA还用于细胞信号传导中磷酸化蛋白、凋亡 图1 CBA技术原理 相关蛋白分析，系统性红斑狼疮 （SLE ）和新生儿脓血症 CBA 是利用一系列荧光强度不同的微球，同时对样 等免疫疾病的监控，肿瘤研究，药效评估，药物研发，疫 本中的多种可溶性蛋白进行分析的流式检测方法。每个 苗研究，总体免疫功能分析等很多领域。随着FACSArray CBA微球大小一致，具有特定的荧光强度，包被有适用于 生物分析仪的诞生，CBA与FACSArray组成了液相蛋白高 特定分析 （如其它抗体或者可溶性蛋白）的特异性捕获抗 通量快速检测的黄金组合。 体 （Capture Antibody ），提供了类似ELISA孔板的捕获表 1. CBA与糖尿病研究[1] 面。当微球和待测样品溶液混合后，微球上的特异性抗体