进出口化妆品中多种禁用着色剂的测定 高效液相色谱法和液相色谱法-串联质谱法 编制说明.docVIP

化妆品进出口化妆品中多种禁用着色剂的测定 高效液相色谱法和液相色谱-串联质谱法 编制说明 任务来源 本标准是根据国认科[2012]36号文件，国家认监委下达的编号为2012B119“进出口化妆品中多种禁用着色剂的测定 高效液相色谱法和液相色谱-串联质谱法”行业标准制定计划，由浙江出入境检验检疫局负责起草制定的。 编制依据 本标准按照GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》和GB/T?20001.4-2001《标准编写规则 第4部分：化学分析方法》给出的规则进行起草。 制定本标准方法的必要性和重要性 化妆品是与人体直接接触的日用产品，其质量好坏直接关系到消费者的健康。化妆品中含有多种化学物质。因遮盖力、着色力强，有机合成色素被广泛用于指甲油、眼影、唇膏等美容化妆品中。但是很多合成着色剂对人体有害，有些会引起皮肤过敏，甚至致癌、致畸、致突变等[1,2]。 世界上很多国家对化妆品着色剂的使用作了法律性规定。我国《化妆品卫生规范》（2007版）、欧盟化妆品指令76/768/EEC和美国食品药品监督管理局(FDA)对化妆品用着色剂的品种、使用范围和限制条件都作了明确的规定[3-5]。我国、欧盟和美国禁止使用的着色剂有颜料橙5 (C.I.12075)、酸性黄36 (C.I.13065)、颜料红53 (C.I.15585)、酸性紫49 (C.I.42640)、罗丹明B (C.I.45170)、结晶紫 (C.I.42055)、溶剂蓝35 (C.I.61554)、苏丹红Ⅰ (C.I.12055)、苏丹红Ⅱ (C.I.12140)、苏丹红Ⅳ (C.I.26105)和分散黄3 (C.I.11855)等；美国FDA规定禁止颜料红57(C.I.15850，DC Red No.7)用于眼部化妆品。颜料红53:1 (C.I.15585:1)与颜料红53 (C.I.15585)的阴离子一致，前者为钡盐，后者为钠盐。因为购买不到颜料红53标准品，因此本标准使用颜料红53:1作为标准品。上述禁限用着色剂的结构式见图1。近几年，我国出口到美国和欧盟的化妆品因违规添加不安全色素而频频遭到通报。因此，建立和发展更可靠、更有效的快速测定化妆品中着色剂的分析方法，对于加强化妆品品质的监督和管理，保护人民身体健康具有十分重要的意义。 目前，对化妆品中有机着色剂的测定主要采用高效液相色谱法[6-12]、高效液相色谱-串联质谱法[13]、分光光度法[14]和胶束荧光法[15]等。分光光度法灵敏度较低，且容易受到干扰；胶束荧光法灵敏度较高，但只适用于能产生荧光的着色剂，如罗丹明B等；高效液相色谱-串联质谱法灵敏度高、可适用于大部分着色剂检测，但价格昂贵；高效液相色谱法因其高灵敏度以及分析速度快等特点而被广泛应用于化妆品中有害物质的分析测定[16-18]。目前已有的研究主要针对一些水溶性色素[9,10]、苏丹红[6,12]等，针对罗丹明B的报道多为在食品中的检测方法的研究[19,20]，而能同时检测化妆品中颜料橙5、酸性黄36、颜料红53、酸性紫49、罗丹明B、溶剂蓝35、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅳ、分散黄3和颜料红57的高效液相色谱测定方法和化妆品中颜料橙5、酸性黄36、颜料红53、酸性紫49、罗丹明B、结晶紫、溶剂蓝35、苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅳ、分散黄3和颜料红57的液相色谱-串联质谱测定方法尚未见报道。本标准建立了化妆品中酸性黄36等10种禁限用着色剂的高效液相色谱测定方法和化妆品中颜料橙5等12种禁限用着色剂的液相色谱-串联质谱测定方法，操作简便，分析快速、准确，可以很好的用于化妆品实际样品的分析检测。 图1 13种禁限用着色剂的结构式 制定本方法的依据 高效液相色谱法实验条件的选择 样品前处理条件选择 提取溶剂的选择 分别考察了甲醇、乙醇、乙腈、甲苯、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺和四氢呋喃等溶剂或以上几种溶剂的混合溶剂对油状、粉状和膏状化妆品中目标物的提取效果。结果除THF外其他溶剂都无法溶解膏状样品。分别用THF-DMSO-甲醇和THF-DMF对阳性样品进行提取，THF-DMSO-甲醇的提取效果明显好于THF-DMF。目标物在甲醇、DMSO中的溶解度也较高，因此实验中选用THF-DMSO-甲醇为提取溶剂。但THF的极性较弱，其在反相色谱中的洗脱能力较强，样品溶液中THF的含量太高会产生一定的溶剂效应，导致色谱峰展宽、拖尾。当THF的用量为2.0 mL时，待测物的提取效率最高，峰形也较好；当THF大于3.0 mL时，部分目标峰开始变形。添加回收试验证明，THF-DMSO-甲醇对指甲油、眼影和唇膏中10种着色剂的提取效果较好。 超声萃取时间的选择 由于前处理方法较为简单，仅通过添加回收试验来确定超声萃取时间是不合适的。因此我们考察两次超声时间分别为