NY_T 1277-2007 蔬菜中异菌脲残留量的测定 高效液相色谱法.docVIP

中华人民共和国农业行业标准 NY/T 1277－2007 蔬菜中异菌脲残留量的测定 高效液相色谱法 Determination of Iprodione Residues in Vegetables by HPLC 2007-04-17 发布 2007-07-01 实施  前 言 本标准的附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位：农业部蔬菜品质监督检验测试中心(北京)。本标准主要起草人：刘肃、靳松、林桓。  本标准规定了用高效液相色谱测定蔬菜中异菌脲残留量的方法。 本标准适用于番茄、大白菜、菜豆、结球甘蓝、黄瓜等蔬菜中异菌脲残留量的测定。 本方法的检出限为0.35 mg／kg。 本方法的线性范围为1 mg／L--40 mg／L。 试样中的异菌脲经乙腈浸提，弗罗里硅土柱净化后，用配有紫外检测器的高效液相色谱仪在波长218处测定，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量。除非另有说明，在分析中仅使用分析纯试剂和GB／T 6682中规定的一级水。丙酮。正己烷。丙酮一正己烷溶液[(C3H60+C6H14)=1+1]。丙酮一正己烷溶液[(C3H60+C6H14)=8+2]。乙腈，重蒸。甲醇，色谱纯。无水硫酸钠。氯化钠。弗罗里硅土：0.149 mm--0.250，130℃烘10 h，加5％水减活。异菌脲标准品，纯度≥95％。 异菌脲标准贮备液：准确称取0.0500 g异菌脲标准品，用甲醇(3.6)溶解并转入50 mL容量瓶，用甲醇(3.6)定容，得到1000 mg／L的标准贮备液。异菌脲标准工作液：使用时由3.11稀释得到100 mg／L和10 mg／L的标准工作溶液。其余标准溶液均由3.12稀释得到。高效液相色谱仪，配紫外检测器。分析天平，感量0.1mg和0.01g。均质器，6000 r／--36000 r／min。旋转蒸发仪。玻璃层析柱，15×0.8cm。 将蔬菜样品取可食部分，用干净纱布轻轻擦去样本表面的附着物，将其切碎，充分混匀，用四分法取样或直接放入食品加工机中捣碎成匀浆。匀浆放人聚乙烯瓶中于一16℃～一20℃条件下保存。称取样本时，常温样本应搅拌均匀；冷冻样本应先解冻再混匀。 称取匀浆试样10g(精确至0.01g)于150mL烧杯中，加50mL乙腈(3.5)，在10000 r／min条件均质1 min，滤液经铺有滤纸的布式漏斗抽滤至装有3g～5g氯化钠(3.8)的100 mL具塞量筒中，盖上塞子，剧烈震荡1min，在室温下静止1 h，乙腈相和水相分层(若有乳化现象，加少量水振摇后继续分层)。取10mL乙腈提取液至50mL圆底烧瓶中，在旋转蒸发仪上(水浴温度45℃)浓缩至近干，待净化。在层析柱中依次加入3cm高的无水硫(3.7)，2g弗罗里硅土(3.9)和3cm高的无水硫酸钠(3.7)。用10mL丙酮一正己烷溶液(3.3)预淋柱子，弃去预淋液。先用少量丙酮一正己烷溶液(3.4)溶解6.1得到的蒸残物并转移至层析柱中，然后用60mL丙酮一正己烷溶液(3.4)依照少量多次的原则清洗圆底烧瓶并淋洗，接收全部洗脱液并在旋转蒸发仪上(水浴温度45℃)浓缩至近干，氮气吹干后用2.00mL甲醇(3.6)溶解蒸残物，过0.45／m微孔滤膜，待测。 检测波长：218 nm。 色谱柱：不250 mm×4.6 mm，5／m。 流动相：甲醇一水溶液[(CH30H+H20)=70+30]。 流速：1.O mL／min。 进样体积：20。 保留时问：23 左右。分别将标准溶液和待测液注入高效液相色谱仪中，以保留时问定性，以待测液峰面积与标准溶液峰面积比较定量。 除不加样本外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。试样中异菌脲的残留量用质量分数计，单位以毫克每千克(mg／kg)表示，按公式(1)计算： ω=---------------×F………………….(1) VX×AS×m 式中： ——试样中异菌脲残留量，单位为毫克每千克(mg／kg)； ——标准溶液质量浓度，单位为毫克每升(mg／L)； Vs——标准溶液进样体积，单位为微升()； v。——试样溶液最终定容体积，单位为毫升(mL)； ——待测液进样体积，单位为微(μL)； A——标准溶液的峰面积； Ax——待测液的峰面积；——试样质量，单位为克(g)；F——分取体积／提取液体积。计算结