进出口化妆品中嗜麦芽黄单孢菌的检测方法 编制说明.docVIP

《进出口化妆品中嗜麦芽单胞菌本标准是按照国家出入境检验检疫——《》（计划编号）由出入境检验检疫局承担研究起草。GB/T 1.1—2009进行标准的起草并送专家征求意见；6. 总结反馈信息和意见对标准进行修改；7. 整理资料申报有关部门鉴定。 本标准名称变更申请：1960年该菌首次报道为嗜麦芽假单胞菌（Pseudomonas maltophilia）。 1983年因它能在普通培养基上形成不透明淡灰黄色菌落更名嗜麦芽黄单胞菌（Xanthomonas maltophilia）。 1993年通过DNA-rRNA杂交测定DNA的G+C%含量后它被正式更名为嗜麦芽窄食单胞菌（Stenotrophomonas maltophilia），归于窄食/寡养单胞菌属[1]。鉴于此，本标准名称申请更改为“进出口化妆品中嗜麦芽窄食单胞菌的检测”。 2、目的和意义 随着人们对美的追求不断提高，化妆品已经成为人们的生活必需品。化妆品在生产、贮藏及运输过程中，极易受到环境污染造成微生物污染，对使用者带来极大的危害和安全隐患。但是由于化妆品中加有大量防腐剂，对微生物具有强烈抑制作用，因此往往没有引起人们的足够重视。但因使用被致病菌污染的劣质化妆品导致人身受到伤害的事故却时有发生，这足以给我们敲响警钟。其中嗜麦芽窄食单胞菌就是化妆品中常见的污染菌之一。目前关于嗜麦芽窄食单胞菌的鉴定检测的报道仅停留在对标准菌株的鉴定[2-4]，还没有关于化妆品中该菌的检测的报道，更没有相应的行业标准，因此非常有必要建立一种准确、有效的化妆品中嗜麦芽窄食单胞菌的检测方法。 嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia，S.maltophilia)属于黄色单胞菌目（Xanthomonadales），黄色单胞菌科（Xanthomonadaceae）, 寡氧单胞菌属（Stenotrophomonas）。由于寡养单胞菌属建立的较晚，目前该属仅包括三个种，包括S.maltophilia、S.africana、S.nitritireducens。S.maltophilia在电镜或显微镜下呈直或稍弯的杆菌，0.5×1.5 μm，单个或成对，革兰氏阴性。在自然界中广泛存在，广泛存在于各种水源、牛奶、冰冻食品、土壤、植物根系、动物及人体等，是一种条件致病菌。随着临床抗生素和免疫抑制剂的广泛和大剂量应用，其临床分离率仅次于铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌，居非发酵菌属第3位，呈明显上升趋势。 S.maltophilia主要寄生在呼吸道，引起呼吸道感染，作为条件致病菌，它可引起心内膜炎、败血症、肺炎、脑膜炎、尿路感染等[2]。其致病可能与弹性蛋白酶、脂酶、黏多糖酶、透明质酸酶、DNase、溶血素等有关[5]。该菌对多种抗生素耐药，因而给临床治疗带来很大困难。嗜麦芽窄食单胞菌具有复杂的耐药机制，外膜通透性低，对多种抗生素不易渗透，可产生多种β-内酰胺酶，如青霉素酶，头孢菌素L2酶以及金属锌酶，因此对β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类抗生素耐药，同时对碳青酶烯类抗生素也耐药，对亚胺培南天然耐药。 本标准的研究目的是建立化妆品中S.maltophilia的检测方法，填补化妆品中S.maltophilia检测的空白，为化妆品质量监管、提高化妆品安全质量水平、促进进出口贸易提供重要的方法依据。 3、方法概述, （1）国内外有很多关于S.maltophilia检测方法方面的研究，归纳主要有传统生化-耐药性检测方法和基于分子生物学技术的相关方法。目前,国内外尚无关于化妆品中S.maltophilia的限量要求，也无关于S.maltophilia的检测标准。基于分子生物学技术的方法，包括脉冲场凝胶电泳（pulsed-field gel eletrophoresis, PFGE）[6]、基于16srRNA寡核苷酸探针的荧光免疫杂交技术（fluroescent in situ hybridization, FISH）[7]、种属特异性聚合酶链反应（species-specific PCR, SS-PCR）[8]等。分子生物学方法虽然检测灵敏度高，但仪器价格及所需耗材昂贵，而且对操作者的技术要求非常高，因此不适于生产一线和基层检测机构普及应用。 传统生化方法是微生物检测的经典方法，虽然操作相对繁琐，但却是最可靠最基本的方法，其易于操作、费用低、结果容易判断，而且不需要特殊设备，而检测精度能满足产品安全监测要求，是一种适于普及应用的常规方法。然而，此种检测方法在国内尚缺少相关官方发布的检测标准。 （2）致病菌的检测方法因其所寄存的基质不同而有差异。目前文献报道的关于S.maltophilia的传统生化检测方法都是只对标准菌株的鉴定。化妆品是绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌以及嗜麦芽窄食单胞菌等多种致病