巨大芽杆菌Bacillus+megaterium+A25产生生物絮凝剂的研究.pdf

致 谢 论文工作是在杨惠芳研究员的悉心指导下完成的。杨先生以渊博的 学识，认真的科研态度和勤奋的工作精神教育和和激励着我，让我在科 研工作中锻炼成长。我的论文从选题到实验的每一个小小的进步都凝聚 着恩师的心血。我无法忘记杨先生在我遇到困难时给我的鼓励和启发。 在这里，我谨向她表示我最深切的谢意，感谢导师在三年里对我的培养、 关心和爱护，我将把这种感情带到天涯海角。 另外，本实验室的刘志培、贾省芬、杨彦希、吕人豪老师及张德民、 黄志勇、段俊欣及烟台师范学院的赵礼明同学都在工作上给予我极大的 支持和热心的指导，没有他们的帮助，也便没有我今天我取得的成绩。 非常感激中科院化学所徐桂云老师，她在糖结构分析上给予了关键的 帮助和耐心指点。 感谢生理生态研究室的肖昌松、王保军、张鸿翼、李文忠、周培谨等 各位老师及刘铁汉、朱非、刘朝霞、张伟周等热情相助的同学，他们的 关心和鼓励使我在三年的学习中充满乐趣。 特别感激孙万儒老师及王敖全老师在我困难的时候给予的无私指点。 他们的交谈使我思路开阔。 感谢我的同学王胜兰、王大伟、吴小平、程树华、聂丽萍及大学同窗 吴襟、赵书春、李炜、王浩以及其他所有同学，他们在实验中给予了我 无法回报的帮助。 、 感谢微生物所的谢家宜、苑兰翠等老师在照片拍摄及冲洗方面给予的 热情帮助。 我的先生董玉波自始至终对我的工作给予大力协助，并为我编制了 部分应用程序，在此向他表示致以深深谢意。同时也感激我的父母和姐 姐对我在生活中的关心和照料，他们的关心和期待也是我工作的动力源 泉。 刘紫鹃 2000年8月 北京中关村 摘要 一 一 一 一一一一 摘 要 摘 从活性污泥和底泥中分离到四株产生生物絮凝剂的芽饱杆菌。应用变性 梯度胶电泳 (DGGE)技术对来源不同、形态相似的4株产絮凝剂菌株进行 了同源性分析，结果表明它们具有相同的基因型，属于同一个种。以菌株A25 为代表进一步测定了 F〔rCmol%及对其 16SrDNA进行分析，将此四株芽抱 杆菌鉴定为巨大芽抱杆菌Bacillusmegateriumo BacillusmegateriumA25能产生一种对高岭土有较强絮凝作用的生物絮 凝剂，主要分布于细胞外的培养液中，少量附着于细胞表面。絮凝剂的产生 与生长同步。在最适培养条件下，只需 10-12小时这种胞外絮凝剂的合成即 可达到最高 (4g/L)。各种不同的因素对该絮凝剂作用于高岭土的絮凝活性 的影响表明，所试的二价阳离子((Ce,M广，Be,CuZ)可明显提高絮凝率， 但所试三价离子 (Fe,Al)及一价阳离子 (Na`)对絮凝率无任何作用。絮 凝剂的最适添加量在5-50mg/L的浓度范围内。在碱性条件下 (pH7.7-1L) 该絮凝剂的活性较高，絮凝率可达到90%以上。该絮凝剂对不同的悬浊液、 细胞悬液和污水均有明显的絮凝效果。 用乙醇沉淀及分子筛柱层析的方法纯化得到由BacillusmegateriumA25 合成的胞外絮凝剂的纯品，命名为BP25。物理化学特征表明，BP25的电镜 观察外形为带分叉的丝状形态。分子量约为106道尔顿。BP25在水溶液中是 一种假塑性流体;它是一类多电解质，其硬度参数B为0.023.BP25在60 ℃及pH3-10条件下都比较稳定。 元素组成分析的结果表明，BP25含有0(36.97%),H(6.28%),C (47.00%)，不含N(0%)，蛋白及核酸含量的分析同样表明，该絮凝剂不含有 蛋白及核酸等含N化合物。硫酸一酚法确定BP25为一类多糖类生物絮凝剂， 定量分析其总糖含量达90%。核磁共振进一步表明多糖BP25不含有糖醛酸， 傅立叶红外及核磁共振的结果表明，其糖昔键均为a型。采用