橡胶树白粉菌收集及DNA和RNA提取方法比较.pdfVIP

134 广东农业科学 2013年第 11期 橡胶树白粉菌收集及DNA和RNA提取方法比较 万三连 ，梁 鹏 ，宋风雅 ，张 字，刘文波，缪卫国，郑服丛 (海南省热带生物资源可持续利用重点实验室，海南大学环境与植物保护学院，海南 海 口 570228) 摘 要 ：橡胶树白粉菌(Oidiumheveae)是专性寄生的病原真菌，难 以获取足量和纯度高的菌体 ，因而不易提取到足够多和质 量高的核酸 ，阻碍了该菌的分子生物学研究 ，目前关于橡胶树 白粉菌核酸提取方法少有报道。采用软毛笔刷取和醋酸纤维乙酯撕 取两种方法收集 白粉病菌。在尝试使用常规的菌物RNA提取方法基础上 ，通过优化操作步骤、方法等 ，研究出改 良的Trizol法，用 该法能高效率提取到纯度高的橡胶树白粉菌RNA。比较不同DNA提取方法 的效率 ，推荐使用得率高 、纯度好 的OMEGAFungal DNAkit提取法 ，用于提取橡胶树 白粉菌的DNA。 关键词 ：橡胶树 白粉菌；RNA提取 ；DNA提取 ；改 良Trizol法 中图分类号 ：Q781 文献标识码：A 文章编号：1004—874X(2013)11-0134一O6 ComparisonthecollectionandDNA andRNA extraction methodsoftherubbertreepowderymildew W AN San-lian，LIANG Peng，SONG Feng-ya，ZHANG Yu，LIUWen-bo，MIAOWei-guo，ZHENG Fu—cong (HainonKeyLaboratoryforSustainableUtilizationofTropicalBoiresource／CollegeofEnvironment andPlantProtectoin,HainanUniversity,Haikou570228，China) Abstract：ObligateparasiticfungusOidium heveaeB。A．Steinmanncausedtherubbertreepowderymildew,asitisdifficultto obtainsufficientandhighpurityfunugs，moleculra biologyreserach of0．heveaeishamperedbythequalityandquantityofpowdery mildew’Snucleicacid．Atpresent，nucleicacidextractionmethodsoftherubbertreepowderymildew arerraelyreported．Thesoften brushbushingmethodandcelluloseacetateethylremovedmethodraeusedtoobtainthesufficientO．heveae．Basedonthecommonfungal nucleicacidextractionmethods，throughoptimizedtheoperationsteps，developedanimprovedTrizolmethodfortherubbertreepowdery mildewRNA extraction，whichshowedthatithasahighefficientandtheisolatedRNA isinhighpurity．ComparisonofdifferentDNA extractionmethodstourbbertreepowdery mildew，werecommendedtheOMEGAFungalDNAkitasithashighefficiencyandgood purity． Keywords：urbbertreepowdery