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22 卷 6 期 生 物 工 程 学 报 Vol. 22 No. 6
2006 年 11 月 Chinese Journal of Biotechnology November 2006
一个Ⅱ型甲烷氧化菌中甲烷单加氧酶羟基化酶的分离纯化和理化性质
Methane Monooxygenases Hydroxylase from a Type Ⅱ
Methanotroph : Purification and Physicalchemical
Properties
华绍烽 , 李树本 , 辛嘉英 , 牛建中 , 夏春谷 , 唐 威 , 胡宵雪
HUA ShaoFeng , LI ShuBen , XIN JiaYing , NIU JianZhong , XIA ChunGu , TANG Wei and
HU XiaoXue
中国科学院兰州化学物理研究所羰基合成与选择氧化国家重点实验室 ,兰州 730000
State Key Laboratory for Oxo Synthesis and Selective Oxidation , Lanzhou Institute of Chemical Physics , Chinese Academy of Sciences , Lanzhou 730000 , China
摘 要 甲烷氧化细菌能够催化甲烷和一系列小分子烃类化合物的羟基化反应 ,对控制全球变暖起着重要作用 ,在工业催化
和生物除污中具有非凡的潜能。应用层析方法纯化了 Ⅱ型甲烷氧化细菌 Methylosinus trichosporium IMV 3011 中甲烷单加氧酶的
羟基化酶 ,并对其进行了表征。凝胶过滤法测定了该酶分子量为 2013kD ;SDSPAGE 表明羟基化酶含有三个亚基 (αβγ) ,分子
(α
量分别为 58kD 、36kD 和23kD , 比较两种方法证明该羟基化酶是一个同型二聚体构型 βγ) 2 ,总分子量为234kD 。薄层等电聚焦
( )
测定该酶的等电点为 52 。酶的比活力为6036nmolmin ·mg ,活力回收为 343 % 。HPLC 法测定该酶的纯度在 95 % 以上。原
子吸收光谱显示每分子羟基化酶中含有 302 个 Fe 原子。羟基化酶的稳定性 pH 值为 62～75 ,稳定性温度为低于 35 ℃。菌
株 IMV 3011 的细胞表观构型呈现了长型、稍微弯曲的杆状形态。
关键词 甲烷氧化细菌, 甲烷单加氧酶, 羟基化酶 , 纯化 , 理化性质
( )
中图分类号 Q8141 文献标识码 A 文章编号 2006
Abstract Methanotrophs can catalyze hydroxylate of methane and some hydrocarbon. Which play an important role in mitigating
global warming and have also potential significance for in
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