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临床医学论文-补肾固齿丸对人牙周膜成纤维细胞分泌TGF-β1的影响
????????????? 作者:董伟 姜茵 吴亚菲 张静仪?
【摘要】? 目的研究补肾固齿丸水提液对人牙周膜成纤维细胞(PDLCs)TGF-β1分泌水平的影响,以及在内毒素存在的条件下其分泌水平的改变。方法原代培养人牙周膜成纤维细胞培养液中加入内毒素和不同浓度的固齿丸水提液,在0、2、4、6天不同时间点用ELISA试剂盒检测培养上清液中的TGF-β1水平。结果最高和较高剂量药物组TGF-β1的分泌水平明显高于其他组(P0.05),在含有内毒素组中,最高药物剂量组的TGF-β1水平高于对照组,结果差异具有显著性(P0.01)。结论补肾固齿丸能在一定程度上改变PDLCs分泌TGF-β1的水平,内毒素存影响药物对PDLC的作用。
【关键词】? 补肾固齿丸 TGF-β1 内毒素 ELISA??? 【Abstract】ObjectiveTo study the secretion effect level of transforming growth factor β1(TGF-β1) induced by administration of extracts from Guchiwan, a traditional Chinese medication, on human periodontal fibroblast in vitro with endotoxin. Methods Cultured PDLCs from human teeth were stimulated with LPS and different concentrations Guchiwan extracts. ELISA kit was used to detect TGF-β1 level of different test groups at different time. ResultsA higher level of TGF-β1was observed at the two highest concentration groups of Guchiwan(P0.05). In addition, there was a significant difference in the TGF-β1 levels between thr highest concentration group and the other medication groups or the contaol group (P0.01) in the existence of LPS.Conclusion This study indicates that Guchiwan can influence the secretion level of TGF-β1 from PDLC, which may be less distinct in the existence of LPS.??? 【Key words】bushenguchi pill;TGF-β1;endotoxin;ELISA??? 牙周病是在致病菌和宿主免疫反应失衡的情况下发生的感染性疾病。多种炎性介质和细胞因子参与了牙周病的发生发展过程。TGF-β是一种多肽生长因子,TGF-β1是其重要的亚型之一。TGF-β1能调节牙周组织的免疫应答;促进牙周组织的损伤修复,对牙周膜细胞的增殖和牙周软硬组织的再生起着重要的调节作用,促进牙周膜细胞的增殖及DNA的合成,增加成纤维细胞合成胶原及纤维粘连素,减少基质金属蛋白酶和纤溶酶激活剂的合成和结缔组织的破坏;TGF-β1还能通过对牙胚细胞的调控影响牙体牙周组织的早期发育。牙周组织周围的TGF-β1可来源于血小板,也可来自于牙周膜成纤维细胞自身[1]。补肾固齿丸是依照中医牙周病病因“肾虚齿豁”学说指导,根据补肾固齿的原则,在六味地黄丸的基础上增加了骨碎补、青盐、黄芷等药而制成的治疗方剂。经临床研究和动物实验证实该药具有良好的治疗效果,能改善全身及牙周组织状况,增加牙槽骨致密度,减轻牙周组织炎症和破坏[2]。但迄今为止固齿丸治疗牙周病的确切机制尚不十分清楚,已有学者曾经从细菌学组织学酶组织化学等不同角度对其治疗机制进行研究,发现固齿丸能增强健康菌丛的稳定性,维护正常炎细胞功能等多种作用[3~5]。本研究采用体外细胞培养的方法观测补肾固齿丸水提液对人牙周膜成纤维细胞分泌TGF-β1的影响,探讨补肾固齿丸的作用机制,以期为更好地利用天然药物治疗牙周病提供理论依据。 ??? 1材料与方法??? 1.1主要药品与试剂高糖DMED培养基(Gibco,美国);类标准胎牛血清(兰州民海生物);胰酶(
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