自体外周血干细胞与骨基质明胶复合移植治疗兔桡骨缺损的实验研究.DOCVIP

临床医学论文-自体外周血干细胞与骨基质明胶复合移植治疗兔桡骨缺损的实验研究 ?????????????????? 作者：张小舟　刘秀平　邹三明　王以强　王群涛 【摘要】 目的 观察自体外周血干细胞/骨基质明胶海绵(APBSC/BMG)复合移植治疗骨缺损的疗效。方法 36只家兔双侧桡骨做成长度1.2cm的骨缺损,随机分为每组18只。分别进行X线、生物力学以及组织学的对比研究。 结果 术后第3、6、9、12周,X线观察,改进的Gary评分及光镜观察结果显示,APBSC/BMG组优于BMG组;术后第14周,APBSC/BMG组整骨破坏载荷和骨缺损修复形态学评分均明显优于BMG组。结论 APBSC/BMG在BMG的骨形态蛋白诱导下具有明显的成骨作用,因此APBSC/BMG复合移植治疗骨缺损的疗效优于单纯BMG移植。 　　【关键词】干细胞 骨移植 骨折愈合? 　　【Abstract】Objective To observe the effect of repairing segmental bony defects by the grafting of autologous peripheral blood stem cells (APBSC) andbone matrix gelatin, (BMG) .Methods 36 rabbits were randomly into two groups: APBSC/BMG (group A) and BMG (group B),each group includes 18 rabbits.all the radius of rabbits were made to 1.2cm parative researchs were made by X-rays ,biomechanics and histology.Results group A is better than group B by X-ray obersation ,Gary evaluation grading and obersation result of telescope 3,6,9,12 weeks after operation. group A is better than group B too in total bone destroying load and morphology grading14 weeks after operation.Conclusion APBSC/ DBM caneffectively promote osteogenesis through conduct of BMP(bone morphlogy protein) and it is a new method for the repair of bony defects. 　　【Key words】Stem cell;Bone tansplantation;Bone fracture healing 　　 　　骨基质明胶(bone matrix gelatin,BMG)是一种临床常用的骨移植材料。我们采用自体外周血干细胞(autologous peripheral blood stem cell,APBSC)与BMG复合移植修复骨缺损进行了实验研究,本实验取材简单，在实验中进行了X线检查，生物力学试验，组织学检查，效果理想，达到了预期目的，在临床有广阔的应用前景。现报告如下。 　　1 材料和方法 　　1.1 实验材料 　　1.1.1 BMG的准备 家兔6只,体重2.0~2.5kg，雌雄不限，于耳缘静脉注射10ml空气栓塞处死。取出股骨干，切除两干骺端，剔除附着骨干的软组织及骨膜，刮净髓腔，用生理盐水反复冲洗3遍，经脱脂、脱钙及去除部分水溶性蛋白制成BMG，冻干、C060灭菌备用［1］。术前30min置于生理盐水中。 　　1.1.2 APBSC的采集［2］及APBSC/BMG复合物的制备:家兔术前3天，按50ug/kg体重从耳缘静脉注射粒细胞集落刺激因子(日本ChuGAL制药有限公司)，每天1次。手术前从股静脉抽血8mL，先注入干燥的抗凝试管中摇匀，然后缓慢注入含有等量淋巴细胞分离液Ficoll-Paque(Amersham公司)的试管中，用400g速度离心40min后可见试管内分为4层:最上层为淋巴细胞分离液层;第二层为单个核细胞层(不透明，略混浊);第三层为血清层;第四层为红细胞层。用吸管吸出最上层，弃之。吸出第二层注入另厂无菌干燥的试管中，加入等量生理盐水，用相同的速度再离心5min，吸出底层的单个核细胞层，将其注入10ml含1:1000000肝素的生理盐水中，吹打成细胞悬液，把BMG放入上述混合液