SiO-%2c2-微球与离子螯合微球制备及应用于固定木瓜蛋白酶研究.pdfVIP

摘要 固定化酶可以提高酶的稳定性并增加酶的使用次数，以及易于与 产物和底物分离等优点而被广泛深入的研究。但目前常用的固定化方 法在制备固定化酶时酶活损失较大，且载体常常不可重复使用或载体 的再生操作复杂，限制了固定化酶的产业化应用。本文针对目前固定 化酶方法的不足之处提出了相应对策并对新的酶固定化方法和载体 进行了探索。 本文选用木瓜蛋白酶作为固定化对象，木瓜蛋白酶是一种来源广 泛的巯醇类榱物蛋白酶，在食品、轻纺、医学等领域有着广泛的应用， 木瓜蛋白酶在酶动力学和结构学上都已得到了深入的研究，因此很适 合作为评测酶固定化方法效率的模式酶。 采用正硅酸乙酯与N-(B一氨乙基)一氨丙基三乙氧基硅烷在油包 水形成的微胶囊中同步水解的方法，一步法制各了氨基化的二氧化硅 颗粒，这种颗粒大小均匀，氨基含量和颗粒大小可控，氨基含量高达 5．6衄ol／g。此颗粒经戊二醛处理后，采用共价法固定木瓜蛋白酶， 固定化最适pH6，5，最佳给酶量为15mg／g载体，固定化酶的最适反应 温度为70℃，最适反应pH为6．5，固定化酶热稳定性，pH耐受性， 贮存稳定性都明显高于游离酶，表明此颗粒可作为一种优良的酶固定 化载体。 本文采用了反相悬浮包埋合成磁性琼