人工合成六倍体小麦的遗传多样性研究与抗条锈病新基因的发掘.pdf

摘 要 众多的研究表明，栽培小麦狭窄的遗传基础不仅限制了作物产量和品质的进一步改良，而且 使作物对生物性和非生物性环境胁迫的脆弱性增加;另一方面，小麦野生近缘种中存在有大量可 用于小麦改良的优异基因。因此，发掘并利用野生近缘植物中的关键性基因源，对于拓宽小麦育 种的遗传基础以及小麦育种和生产持续发展具有重要意义。 本项研究以分别引自国际玉米小麦改良中心 (CIMMYT)的97份和中国农业科学院作物品 种资源研究所的16份人工合成六倍体小麦为材料，在进行抗白粉病和条锈病鉴定的基础上，分 别从蛋自质和DNA水平对其遗传多样性进行了研究。获得以下主要结论: 1、在供试的113份材料中，54份材料对小麦白粉病菌15号生理小种具有抗性，其中16份 呈免疫或近免疫;48份材料对条锈病生理小种条中31、条中32和水源 14表现抗性，其中11份 呈免疫或近免疫。 2、运用酸性聚丙烯酸胺凝胶电泳 (A)技术，对%份人工合成六倍体小麦分析结果 表明，分离出的65条醇溶蛋白谱带在不同材料中出现频率的变化范围为1.04%-91.67 ;在遗传 多样性指数(H)及多态性信息含量(PIC)上，p(2.8066,0.9348),。(2.8778,0.8475)谱带 区高于a(1.4311,0.7199)区:发现由3-5条组成、呈现整体遗传的醇溶蛋白群56个，这些醇 溶蛋白群主要分布于7+(0区及a区内:%份材料间的平均遗传距离为0.86，并在遗传距离为。.83 水平上，将其划分为4个类群，类群间的关系基本反映了人工合成六倍体材料的系谱关系。 3、利用十二烷基磺酸钠一聚丙烯酞胺凝胶电泳 (SDS)技术，对 103份人工合成六倍 体小麦的高分子量谷蛋白亚基组成分析结果表明，在Glu-AI位点上共有5种变异类型，即0“,.11; 2*,、1,和2**..，并以0“为主;在Glu-BI位点上共发现12种等位变异类型，并以“14+15,7+811, 6+8三种类型出现的频率最高:在Glu-D]位点上也发现12种等位变异类型，值得注意的是， 在该位点上出现了一未知亚基，该亚基的分子量比目前在普通小麦中发现的最小分子量的谷蛋白 亚基 12还小。此外，与普通小麦相比，某些分析材料的等位位点为杂合状态，存在潜在的遗传 分化。 4、利用SSR分子标记技术，对95份人工合成六倍体小麦的分析结果表明，45对SSR引物 (涉及A,B,D三个基因组6个同源群17条染色体共49个位点)共扩增出326个等位变异位 点，平均每个SSR引物扩增出6.64个等位变异;在SSR位点多态性信息含量 (PIC)和辛普森 指数 (Si)的表现上，D基因组(0.7792,1.7671)B基因组 (0.7037,1.36516)A基因组(0.6561, 1.2712);不同基因组在遗传相似性系数的表现上，A,B,D基因组分别为。.3887,0.3704和。.2526, 说明不同材料间的遗传差异较大;通过UPGMA进行聚类分析时，由3个基因组分别聚类所得的 树状图各不相同，说明人工合成六倍体小麦遗传多样性在不同基因组上存在差异。 5,条锈病抗性鉴定和遗传分析表明，人工合成六倍体小麦M08携带一个显性抗条锈病基因; 利用SSR分子标记技术和F2群体分组分析法 (BSA)研究表明，该抗条锈病基因位于小麦3BL, 与微卫星分子标记WMS77-13obp,WMS285-230bp和WMS131.160bp具有连锁关系，其中与 WMS131.160bp之间的遗传距离为7.8cM;结合系谱分析和抗条锈病基因推导分析，该基因来源于 硬粒小麦，是一个新的小麦抗条锈病基因，暂定名为YrAma 上述研究结果说明，本项研究所分析的113份人工合成六倍体小麦，不仅携带有大量的抗白 粉病、抗条锈病和优质基因，而且具有)’一泛的遗传多样性，可作为栽培小麦改良的重要基因源加 以利用。 关键词:人工合成六倍体小麦，遗传多样性，蛋白质，SSR，抗条锈病新基因 Abstract Withthedevelopmentofwheatbreeding,avastofresultsindicatedthatnarrowgeneticbasisof wheatresourceshasbecomealimitingfactorintheprocessofthewheatyieldsandquality improvemen