复方鳖甲软肝方药物血清干预TGFβ1影响大鼠离体肝星形细胞活化的研究.pdfVIP

中文摘要 复方鳖甲软肝方药物血清干预 TGF-D 1影响大鼠离体肝星形细胞活化的研究 中文摘要 肝纤维化是机体对于慢性肝损伤的一种修复性应答，也是各种慢性肝病向肝 硬化发展的必经阶段。在多种细胞及细胞因子参与下，引起细胞外基质(extracelluar 生的主要机制。 stellate cell，HSC)是肝脏产生ECM的主要细 现已证实，肝星形细胞(hepatic 胞，HSC的激活是肝纤维化发生的中心环节。各种损肝因素导致肝损伤，继而引 起肝细胞坏死及炎症刺激，相关细胞分泌各种细胞因子激活HSC，产生大量的 derived factor，PDGF)、胰岛素样生长因子．I(insulin．1ikefactor，IGF—I)、转化生 growth growth 长因子(transforminggrowthfactor，TGF．0)等均属关键的CK。 脊椎动物中的TGF．9s可分TGF．DJ-5五种亚型，而人和哺乳动物现已确认的 是TGF—p 并促进分泌胶原纤维的主要细胞因子，其中TGF．D。在体细胞内所占比例最高( 90％)，活性最强。TGF—B Smamothers and TGF．目l可通过C．elegans against 1，APl)转录因子诱导HSC凋亡，也可通 作用于激动蛋白．1(activatingprotein ofnuclear B抑制物(inhibitor B，IKB)及 过稳定核转录因子kappa factor-kappa 从而抑制肝纤维化的发展；TGF—pl还可通过Smads通路对0cl(I)胶原基因(coll 。【1)、组织金属蛋白酶抑制物(tissueinhibitor derived 生长因子基因如血小板衍生生长因子(platelet muscle a一平滑肌肌动蛋白(＆．smoothactin，饶一SMA)基因、胶愿酶／基质金属 PDGF等其他细胞因子，并诱导HSC表达这些细胞因子受体，从而促进HSC增殖、 产生胶原，同时抑制细胞外基质晦降解，加速肝纤维化的发展。TGF一0t对HSC的 促活化和促凋亡主次作用的体现取决于两作用相对效应强度差。目前认为促HSC活 化作用的效应强度大于促HSC凋亡的作用强度，故综合效应表现为促进肝纤维化。 近十多年的研究显示，中医药抗肝纤维化临床效果较好，加之毒副作用较低 而前景广阔。本实验采取的复方鳖甲软肝方由鳖甲、党参等十一味中药组成，可 扶正祛邪，活血化瘀。其临床有效率达81．67％，治愈率达55．23％，系国家级中药 复方鳖甲软肝方药物血清干预TGF—B；影响大鼠离体肝星形细胞活化的研究 新药(批准文号：国药准字1999，2-102号)，已上市。实验在细胞培养体系中添加 TGF一§1以刺激HSC充分活化，观察TGF一口l所导致的HSC生物学行为的改变， 以及复方鳖甲软肝方药物血清的干预作用。目的在于进一步深入探讨复方鳖甲软 肝方药物血清影响HSC活化的作用机制。 1．复方鳖甲软肝方药物血清对活化的HSC自分泌TGF．D1的实验研究 本实验运用免疫组化和图像分析技术方法，对离体活化的HSC自分泌TGF— Dl进行半定量分析，观察复方鳖甲软肝方药物血清对HSC自分泌TGF—D，的影响， 以探讨复方鳖甲软肝方药物血清抗肝纤维化的作用机制。结果显示，IFN—Y和复 方鳖甲软肝方药物血清均