白细胞介素10和白细胞介素12在血液透析患者免疫功能缺陷中的作用.pdfVIP

中文 摘 要 前 言 瘫 持性血液透析(MHD)患者存在明显的免疫功能缺陷，易并 和肿瘤。血液透析时所用的透析膜的生物相容性能直接影 响患者的免疫功能状态。所谓透析膜的生物相容性是指透析膜同 MHD患者血液接触所发生的特异或非特异反应，以及引起多种细 胞因子(CK)释放的程度等，因此CK如白细胞介素1、白细胞介素 6等被认为是评价透析膜生物相容性的重要指标。由外周血单个 核细胞(PBMC)分泌的白细胞介素12(IL一12)和白细胞介素10 (IL一10)是参与机体免疫功能的重要CK，在一定程度上分别反 映机体的细胞和体液免疫T/J1C杜TI7竺1}MHDt}gj}:u 用不同生物相容性的透析膜进行血液透析后PBMC表达、分泌IL 一12和IL一10的变化，以及补体的激活同二者的关系，研究透析 膜的生物相容性对MHD患者T。亚群细胞功能的影响，探讨MHD 患者免疫功能缺陷的机制，为IL一12和IL一10能否成为新的透 析膜生物相容性指标提供理论依据。 一隧验“料 主要试剂和仪器:IL一12和IL一10的ELISA试剂盒(一步 法)购于中国晶美生物工程有限公司;TRIZOL,TagDNA聚合醉、 反转录试剂盒购于上海Sangon公司。紫外分光光度仪(Beckman USA);PCR扩增仪(PE9600USA);醉标仪(Bio一RadUSA);GDS 8000成像分析仪(BDUK)。 实验方法 1、研究对象 终末期肾脏病(ESRD)患者20例，10例为MHD患者(MHD 组)，非透析患者(NHD组)。10例MHD患者先后使用醋酸纤维 膜(CA)和聚讽膜(PS)各2个月，据所用透析膜不同将MHD患者 分为CA组和PS组， 各组均10例。10名健康人为对照组(CON 组)。 2、检测方法 同类透析器复用后留取透析前、后抗凝血。分离血浆，ELISA 法检测血浆中IL一10,1L一12水平。培养PBMC，加或不加LPS刺 激，ELISA法检测培养上清中IL一10,1L一12水平。RT一PCR检 测PBMC中IL一10,IL一12mRNA表达。血浆补体C3,Cr,BUN水 平为常规检验项目。 3、统计分析 组间比较采用方差分析、配对t检验或非参数分析。IL一10, IL一2‘和补体之间相关性采用直线相关分析。显著性差异标准 为P0.05,P0.01为非常显著差异。 结 果 1.血浆IL一10和IL一12的水平 1.1 除NHD组有4/10患者血浆中检侧到了IL- 10存在 (平均24.2ng/L)，其余均未检侧到血浆IL一10, 1.2血浆IL一12(血红蛋白校正后)的水平。 NHD组，CON组，CA组和PS组血浆IL-12水平分别为325. 1t114.7,52.6t32.8,174. 01土59.14(透析前)和98.94土54. ·2 · 24ng/L(透析前)。CON组明显低于其余三组，P0.01;NHD组 高于CA组和PS组(透析前)P0.05;透析前CA组和PS组间血 浆IL一12水平有显著差异，P0.050 2.CA组、PS组透析后血浆IL一12和补体C,呈负相关，相关 系数分别为一0.66和一0.710 3.各组受试者PBMC培养上清液中IL一10和IL一12水平 3.1各组受试者PBMC培养上清液中IL一10水平 无LPS刺激各组PBMC培养上清液中均未检测到IL一100 LPS刺激后各组PBMC培养上清液中IL一10水平由高到低组为 CON组、PS组、CA组和NHD组，各组间差异有显著性。