蛋白激酶C在肝细胞生长因子诱导血管内皮生长因子表达过程中的作用.pdfVIP

中国临床医学 2011年 10月 第 18卷 第 5期 ChineseJournalofClinicalMedicine，2011．Vo1．18，No．5 595 论著 蛋 白激酶 C在肝细胞生长因子诱导 血管内皮生长因子表达过程中的作用 潘志刚 刘康达 胡美玉 吴伟忠一 (复旦大学附属 中山医院全科医学科，实验研究中心，一肝癌研究所，上海 200032) 摘要 目的：探讨 MHCC97H细胞 中蛋 白激酶C(PKCs)在肝细胞生长 因子 (hepatocytegrowthfactor，HGF)诱导血管 内皮生 长 因子(vascularendothelia1growthfactor，VEGF)表达过程 中的作用。方法 ：将 MHCC97H细胞分为对照组、HGF组、cal— phostinC组 、BIM 组 、Ro31-8220组 、∈一PS组 ，分 别用逆转录聚合酶链反应 (RT—PCR)、蛋 白免疫 印迹 (WesternBlot)法及 免疫 沉淀法分析各组 中VEGFmRNA、蛋 白质表达及磷酸化 PKc∈水平变化情况。结果：广谱 PKC抑制剂 Ro31—8220能够完全抑 制 HGF所诱导的VEGF蛋 白质升高(P0．01)。calphostinC、BIM 能够抑制 HGF诱导的PKCB和 PKCs磷酸化 (均 P 0．01)。BIM 不能抑制 HGF诱导的VEGFRNA及相应蛋 白质 的表达(P0．05)。PKCK特异性抑制蛋 白 一PS能够抑制 HGF 诱导的PKc《磷酸化及 VEGF蛋 白质表达(P0．01)。结论：PKCs是 MHCC97H细胞 中HGF诱导VEGF表达路径的中间 信号调节分子 ，HGF在 MHCC97H细胞 中主要通过磷酸化方式调节 PKCs。HGF诱导的MHCC97H细胞 的VEGF表达是 通过 aPKC的PKCe调节的，cPKC、nPKC路径不参与MHCC97H 中HGF诱导VEGF的表达过程。 关键词 肝细胞癌 ； 蛋 白激酶 C； 肝细胞生长 因子 ； 血管内皮生长因子 中图分类号 R55 文献标识码 A RoleofProteinKinaseC in theProcessofHepatocyteGrowthFactorinducingVascularEndothelialGrowth FactorinMHCC97H PA』＼，Zhigang L UKangda HUMeiyu WUWeizhong— Departmentof GeneralPractice， LaboratoryResearchCenter，一 InstituteofLiverCancer， ongshanHospital，Fu— dan iversitY 。Shanghai200032．China Abstract Objective：TostudytheroleofproteinkinaseC(PKCs)intheprocessofhepatocytegrowthfactor(HGF)inducingvascular endothelialgrowt hfactor(VEGF)inMHCC97H cells．Methods：MHCC97H cell1inewereculturedanddividedinto6groups：control groupthatwithoutanyadditionalstimuli；HGFgroupthataddedHGFat6Ong／ml；calphostinCgroupthatMHCC97Hwascultured thcalphostinCat1uM lhinadvanceandthenaddedHGFat60ng／m1．BIM groupthataddedBIMat1uM lhinadvanceandthenadd— edHGFat60ng／ml。Ro31—8220groupthatcellwasculturedwithRo31—8220at1％M lhinadvanceandthenaddedHGFat60ng／ml， }PSgroupthatadded}PSatIO0~M lhinadvanceandthenaddedHGFat60ng ／m1．RT—PCR，