利用微卫星标记定位太空诱变玉米细胞核雄性不育基因研究.pdf

摘要 利用雄性不育是实现玉米杂种优势的重要途径之一，基于玉米细胞质雄性不育材料 易受病害侵染，研究者们将目光投向细胞核雄性不育。四川农业大学玉米研究所于1996 年利用返回式实验卫星搭载玉米品种川单9号种子，太空诱变处理获得雄性不育突变材 料，经遗传分析证实为细胞核隐性单基因雄性不育，运用微卫星标记技术，以姊妹交多 步定位了该核不育隐性基因，主要结果如下： 间育性鉴定结果为，79株完全不育，69株完全可育，适合性测验表明该姊妹交定位群 体育性分离符合1：1理论比率，不育性状受一对细胞核隐性不育基因控制。 2．本研究采用集团混合分群法，未能成功筛选到多态性引物，通过降低集团混合 目标性状各任选一株不育株和可育株，筛选多态性引物，在供试的517对SSR引物中， 经3％琼脂糖凝胶电泳紫外检测发现，406对SSR引物能进行有效扩增，其中3对引物 在不育单株和可育单株间DNA扩增呈现明显差异。 3．利用定位群体对这3对引物进行共分离分析，结果在呈现差异的3对SSR引物 141与控制不育性状的核不育隐性基因 中仅bnlgl141同目标性状呈共分离，表明bnlgl 存在连锁关系，初步将该隐性核基因定位于第2染色体上，利用作图软件计算出核不育 cM。 141的遗传距离为35．3 基因与微卫星标记bnlgl 4．本研究结果表明，降落式PCR相对于普通PCR可提高扩增片段的特异性，主 要原因在于降落式PCR考虑到不同SSR引物需要的最佳退火温度不同。 本文还就PCR反应体系的优化及其影响因素进行了探讨。 关键词：玉米 卫星搭载 细胞核雄性不育 SSR基因定位 Abstract Itisall methodof heterosis maizemale important obtaining byusing sterility．The areinfected Cornsouthernleaf the maize malesterilematerials easlyby blight，SO cytoplasm searchofmaizemale wastransferredfrom malesterilematerialsto sterility cytoplasm for nuclearmale materials．Wesentmaizeseedssatelliteaboardin1996and a sterileity got mutantinthe ofthe Danno．9．In nuclearmalesterile offspringsinglehybrid—chuan order to this sistercross detected material,the analysis with moleculermarker．Themainresults SimpleSequenceRepeat concludedasfollows． 1．Thereare ninenormalfertile and nine malesterile in