顺铂致卵巢功能早衰发病机制与金雀异黄素调节作用实验研究.pdf

第一部分前言 第一部分前言 ovarian 卵巢功能早衰(premature 素血症和高促性腺激素血症为临床特征，是一种较为严重的威胁生殖健康的疾病。特别 是近年来，随着肿瘤和免疫性疾病发病率增加，化疗损伤成为近年来POF发病的一个重 要病因。据WBO国际肿瘤研究理事会(IARC)负责人Dr．Bernard 年全球肿瘤发病率将上升50％，达到每年1500万。我国卫生部统计表明，20世纪90 年代国内肿瘤发病率已上升为10万人中有127例，近年每年新增肿瘤患者近170万人。 而儿童和青少年的发病率也呈逐年增加的趋势。目前，肿瘤和大部分免疫性疾病较为确 切的治疗方案都离不开化疗。随着肿瘤患者的增加，POF的发病率也将明显增加，特别 是处于青少年期和生育期女性，其损伤作用的影响将更为深远。 妇科恶性肿瘤占所有女性肿瘤的12％～15％，尽管多数发生于老年女性，但仍有21％ 发生于年轻未育女性，而抗肿瘤治疗经常会对其生育功能有影响。目前，随着手术、放 化疗水平及分子生物学的不断进展，肿瘤患者的存活率逐渐上升，临床治疗目的已不限 于延长生存期，提高患者的生活质量已成为妇科医师的主要任务，因此对于年轻未育患 者首先面l|盎的问题是如何保留生育功能。现代临床治疗伦理学越来越受到重视，其核心 观点即是对人生命和生存质量的关爱，生育功能作为女性健康的重要组成部分，是生存 质量的一个重要体现。 ● 基于现代医学理论和药物研发经验，为开发新型安全可靠的POF功能调节和改善药 活性的化合物。PE具有广泛的健康效应，尤其是与激素相关的疾病。由于植物雌激素对 人类有明显的保健作用，无明显的毒性作用，因而受到世界上许多科学家的重视。对于 肿瘤或部分免疫性疾病而言，如果施予外源性的雌激素样作用，则其影响往往是负面的， 甚至可能是致命性的。PE的出现则打破这个“规则”，特别是对于POF患者而言，更可 能是一种辅助性治疗的开始。目前，对于PE的研究正在逐步深入，国内有学者已经提出 由中药雌激素受体调节剂来取代植物激素的称谓，这样就更为准确切和科学地概括了这 类药物的实质。这也为我们寻找和拓展用于POF治疗的天然药物提供了基础理论和基本 素材。 本研究室是国内较早开展植物激素研究单位之一，在历时近十年的研究中，取得了 大量丰硕的研究成果。综合前期实验，通过中、西医结合的研究方法对化疗损伤性POF 发病及其PE治疗的机制探讨，为更好地完善和发展祖国医学理论，提供新的研究平台研 究模式，为植物激素受体调节剂科学学说及其对POF治疗提供科学的实验依据。 2 顺铂致卵巢功能早衰发病机制与金雀异黄索调节作用的实验研究 第二部分摘要 化疗损伤性POF发病机制与GEN调节作用的实验研究 一研究背景 近年来，恶性肿瘤的发病率呈持续升高，因化疗而导致卵巢功能低下和不孕的患者 日渐增多，成为POF发病的一个重要原因。化疗治疗用药易引发生肝、肾毒性，形成肝 肾阴虚证，虚火内扰，冲任失充，气血化源不足，性腺失养而功能低下，甚至造成闭经 和不孕。本病确切病因尚不清楚，在临床防治中多采用激素替代治疗(hormone replacement 性肿瘤的发病风险。寻找安全、高效物植物药物是目前POF防治研究中的难点之一。 二研究目的 以建立稳定的化疗损伤性POF动物模型为平台，探讨GEN对化疗损伤性POF的治疗 作用及机制，揭示中药单体的分子药理作用靶标，挖掘POF发病及GEN治疗作用的基因 表达特征，绘制其网络调控的生物信息学图谱，从而完善中药雌激素受体调节剂HRT治 疗作用学说。 三研究方法 构建化疗损伤性POF动物模型，为系统化研究POF搭建动物实验平台；采集大鼠卵巢颗 粒细胞进行体外原代培养，为深入研究POF建立起细胞研究平台；运用免疫组织化学技 术、电子显微镜技术、蛋白免疫印迹技术、酶联免疫技术、流式细胞分析技术、激光共 聚焦技术、基因芯片技术和生物信息分析技术等方法，系统研究POF的病理机制及GEN 的影响作用途径与作用靶点。 四研究结果 1．化疗损伤性POF动物模型建立与评价 化疗损伤性卵巢功能早衰的发病过程：其生物学行为性状改变符合POF的临床表现，证 属肝肾阴虚：血清卵巢激素水平下降，促性腺素水平升高；卵巢组织学出现生长卵泡发 育阻滞，卵泡闭锁增加，间质部分增生、纤维化样改变。通过