耐受Pb^2＋细菌的筛选及对Pb^2＋吸附特性的研究.pdfVIP

第32卷 第5期 绵阳师范学院学报 Vo1_32 No．5 2013年5月 JoumalofMianyangNormalUnivers May．，2013 耐受 Pb2+细菌的筛选及对 Pb2+吸附特性的研究 李 辉，马 丽，李 华，屈 波 (绵阳师范学院 资源环境工程学院，四川绵阳 621000) 摘 要：通过驯化培养从受Pb 污染的土壤中分离到l株能在含Pb“浓度为300mg·L 液体培养基中生 长的耐Pb 细菌茵株 (B19)，对该菌株吸附Pb“能力及影响吸附Pb 的因素进行 了探讨．结果表明：该菌株对 Pb 的吸附速率较快，在5min内，培养液中Pb 去除率达到76．4％，在30min达到吸附平衡．pH、培养基、菌量、 Pb 初始质量浓度对去除率有显著影响．在吸附时间为30min，吸附温度为30qC，菌龄为3d，牛肉膏蛋 白胨培养 基培养，pH5．5，Pb 质量浓度85mg·L～，茵量6g·L 时，其对Pb“去除率可达92．6％． 关键词：重金属；Pb“；耐受性；生物吸附；筛选 中图分类号：X53 X172 文献标识码：A口 文章编号 ：1672-612x(2013)05-0061-06 铅在 自然界分布很广，常以硫化铅即方铅矿形式存在．据估算 ，每年由岩石风化产生的铅，约为5．6万 吨，由河流输往海洋的铅，约为 11万吨．全世界每年消耗铅量约为400万吨，其中大部分以不同的形式排放 到环境中，导致环境重金属污染．铅对生物具有较大的毒害作用，所以必须消除环境中铅污染．重金属废水 的处理方法主要电解法、活性炭吸附法、离子交换法、化学沉淀法．这些方法在重金属污染处理中取得了一 定的效果，但是这些方法处理过程繁琐，处理成本高，对低浓度重金属废水处理效果不理想，有的还会对环 境造成二次污染，这些缺点导致了其应用受到限制 I4J．由于生物吸附法具有很多优点而受到研究者的青 睐 ．本研究利用微生物受环境重金属的胁迫而产生抗性这一特点，从受铅污染的土壤中分离筛选对铅 具有较高耐受性和吸附能力的菌株，并研究不同因素对铅吸附能力的影响，筛选出其吸附铅的最佳条件， 为将其用于铅污染废水的生物治理奠定基础． 1 材料和方法 1．1 培养基 牛肉膏蛋白胨培养基_9J． 含铅培养基：将牛肉膏蛋白胨培养基和硝酸铅溶液分别灭菌后，按照所需Pb。浓度将两者混合． 1．2 抗铅细菌的分离 取5gPb 污染的土样接种于装有45mL含Pb 50mg·L 的牛肉膏蛋白胨液体培养基的三角瓶中， 28℃160r／min振荡培养 3d，静置后取菌悬液5mL依次转接于含Pb“100mg·L～、150mg·L～、200mg · L 的液体培养基中按上述方法驯化培养．最后取经含 Pb“200mg·L 驯化培养液接种于含 Pb。200 mg·L 的牛肉膏蛋白胨固体培养基中，于28℃恒温培养3d，挑取菌落形态不同的单菌落反复分离、镜检 直至获得纯培养菌株． 1．3 菌株 Pb 抗性实验 将上述分离得到的耐铅菌株制成菌悬液，取一定相同量的菌悬液分别接种于50mL含 Pb 0mg· L一、200mg·L～、250mg·L～、300mg·L～、350mg·L～、400mg·L 牛肉膏蛋白胨液体培养基中，于 28℃恒温振荡培养 18h，测定其OD6oo值． 收稿 日期：2013-02--01 回修 日期：2013-05-08 第一作者简介：李辉(1972一)，女，讲师，主要研究方向：环境监测与分析 第32卷 绵阳师范学院学报 (自然科学版) ·62· 1．4 Pb“吸附实验 将菌株接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，30oC160r·min一恒温振荡培养72h后将培养物离心收 集菌体．将收集到的菌体称量加入到20mL含 Pb 水溶液中，按不同的实验要求振荡吸附后，离心，取上清 液测定 Pb 浓度，每个实验做3个重复．铅的测定按照国标原子吸收分光光度法进行 ． 去除率公式如下： 去除率(％)= 嘉云鐾 oo％ 2