卡氏肺孢子虫肺炎动物模型实验诊断的研究.pdfVIP

卡氏肺饱子虫肺炎动物模型实验诊断的研究 摘 要 目的:比较采用 SD大鼠和 Wistar大鼠建立卡氏肺抱子虫肺炎 (Pneumocystiscariniipneumonia,PCP)动物模型的差异，寻找适用 的实验诊断方法。方法:SD大鼠和Wistar大鼠均随机分成实验组和 对照组。实验组皮下注射醋酸可的松，每周两次，以诱导 PC的产 生，对照组不给药。8周后，收集肺组织和支气管肺泡灌洗液 (BALF)，制成肺印片和BALF涂片，作Giemsa染色以检查卡氏 肺抱子虫滋养体和包囊，并用传统方法提取肺组织及BALF沉渣中 :收集实验组SD大鼠和 }`3.PC_DNA,TTPCRficPCR-ELISA歉，经Giemsa染色后，在 肺印片中查见滋养体和/或包囊的阳性率分别为89.29%和 100%,两 者之间无显著性差异 (p0.05);BALF阳性率分别为60.71%和 78.57%，两者之间亦无显著性差异 (p0.05)。而同种大鼠的肺印 片与BALF涂片，其阳性率之间有显著性差异 (p0.05)，且肺印 片的检出率均显著高于BALF涂片。两种大鼠取自不同肺叶的肺印 片，其阳性率之间无显著性差异 (p0.05)，但其虫荷以右叶肺为 高。Wistar大鼠早于SD大鼠诱导后死亡 (19d/24d)且易于检获PC 虫体 (19d/28d)，对照组均未检获到滋养体或包囊。PCR:实验组 两种大鼠肺组织标本阳性率分别为%.43%和100%,BALF阳性率亦 分别为%.43%和 100%，它们之间均无显著性差异 (p0.05)。对 照组仅 1例 SD大鼠肺组织和BALF阳性，Wistar大鼠皆为阴性。 PCR-ELISA:实验组两种大鼠肺组织标本阳性率分别为 %.43%和 100%,BALF阳性率亦分别为%.43%和 100%，它们之间均无显著 性差异 (p0.05),。对照组 10份标本，两种大鼠的肺组织和BALF 均有例‘阳性夕结论:SD大鼠与Wistar大鼠在作为PC模型动物的 选择上无大的差别，不过Wistar大鼠比SD大鼠更快地诱导成功。 肺印片比BALF涂片的检出率高，肺印片的阳性率与肺叶位置无 关。PCR和PCR-ELISA是一种检出率较高的方法，特别适用于早期 -}-M$fL7$.fl$3ctihM}1竺0}iiarmm - 一 提要 诊断;PCR-ELISA的敏感性很高，特异性较好，且安全无毒性，又 比较简便，是一种易于推广的检测方法 。 关键词:卡氏肺抱子虫肺炎 动物模型 Giemsa染色 PCR PCR-ELISA 卡氏肺饱子虫肺炎动物模型实验诊断的研究 提要 ABSTRACT [OBJECTIVE]TocompareSpragueDawley(SD)withWistarin ratmodelofPneumocystiscariniipneumoniaandfindapplicable laboratorymethods.[METHODS]SDandWistarratsweredividedinto experimentalgroupandcontrolgrouprandomly.Theexperimentalgroup wasinducedbyimmunosuppressionwithtwiceweeklyinjectionsof hydrocortisonacetatefor8weeks.Lungtissuesandbronchoalveolar lavagefluid(BALF)werecollected.Smearsweremaderfomlungtissues andBALFsediments,andwerestainedbyGiemsa.Smearswere examinedforidentifyingP.cariniiorganisms.P.cariniiDNAextractedby conventionalmethod was detected with PCR and PCR-ELISA. [RESULTS]Giemsastain: