易感白垩病西蜂相关基因标记的RAPD筛选研究.pdfVIP

易感白至病西蜂相关基因标记的RAPD筛选研究 中文提要 易感白坚病西蜂相关基因标记的RAPD筛选研究 研究生 郭晓红 导师 蒋没 汪成富 中 文 提 要 为探讨西蜂 白至病性状相关基 因，本文 以 1b种 随机 引物对 易感 白坚病西蜂和抗 白坐病西蜂 的基 因组 DNA进行 了RAPD分析。诊现在表现多态性的9种引 物 中只有一种 引物揭示 了易感和抗病 西蜂 间的多态 性，将其标记为 P14s8。 用 P1438。对 2品系易感西蜂 和 3品系抗病西蜂进行了 10次以上重复 RAPD检测 ， 均获相同结果。标记 P1438。只出现于易感西蜂中，而 抗病西蜂均不表现。进一步用 380bp一地高辛探针检测 RAPD产物 的 Southern杂交和基因组 DNA斑点杂交， 结果两种杂交表现一致，即380bp探针只与 2品系易 感西蜂杂交，而与 3品系抗病西蜂不杂交。对 380bp 片段进行了测序鉴定。这些结果提示 :(1)P1438。可 作为易感 白奎病西蜂的一个特异标记。(2)380bp一地 高 辛探 针 可作 为 筛选 易感和抗 白至病 西蜂 的特 异探 针。(3)380bp片段与西蜂白至病性状基因密切相关， 可能 由于易感基 因的引入增加 了这类 引物与之结合 的 位 点 ，从而扩增出此特异片段肠研究用RAPD方法 获得 的 P1438o标记为鉴定西蜂对 白至病 的易感性提供 了便 捷 之 路 ，也对今后转基因技术用于改 良蜂种具有 一定 的指 导意义 。 了 关键 词 : RAPD 地 高辛探 针 杂 交 易感白至病西蜂相关基因标记的RAPD筛选研究 英文提要 screeningandStudyofGenemarkerscorrelatedto WestHoneyBeesusceptibletoChalkbrood DiseasebyRAPD Abstract: Toobtainchalkbrooddiseasecorrelativegene fragmentofwesthoneybee.Therandom amplifiedpolymorphic DNA(RAPD)analysiswasmadeinsusceptibleandresistantgenomeof westhoneybeewith16randomprimers.Onlyoneoutofnineprimers indicatedthepolymorphicDNAbetweensusceptibleandresistantwest honeybee.ThepolymorphicbandswereassignedtobeP1438o.Using thepolymorphicprimer14todetecttwobreedsofwesthoneybee susceptibletochalkbrooddiseaseandthreebreedsofthoseresistantto chalkbrooddisease.RAPD showedthesameresultsmorethanten replications.P14380wasonlyamplifiedinsusceptiblewesthoneybee andabsentinalloftheresistantwesthoneybee.Further380bp- digoxigenin-labeledprobewasusedtodetectSouthernblottingof RAPD productionsand dotblotting ofgenomeDNA.Two hybridizationsspotorbandwasonlyappearedintwosusceptible breedsbutabsentinthreeresistantbreeds.380bpfragmentswasalso sequence