小麦抗白粉病基因高效表达载体的构建及遗传转化.pdf

摘要 白粉病是小麦的严重病害，影响其产量和品质。随着抗病分子生物学的发 展，利用植物本身的抗病资源来提高其抗病性，是一种有效的途径。在植物的 抗病中，抗病基因和防卫反应基因是两类重要的基因。小麦碰肼基因是一个 类受体蛋白激酶基因，小麦仡嬲御基因编码促分裂原蛋白激酶激酶激酶，研究 表明它们参与小麦对自粉病的抗性反应。本研究的目的是利用现代基因工程技 术，对高产、但感白粉病的小麦新品种“周麦18”中的脱腻饴船御基因表 达调控(进行过量表达和部分抑制)，提高小麦对白粉病的抗性。通过研究获得 以下结果： 1．表达载体构建：将小麦忍￡删，佑嬲w基因的全长或部分片段连接在 pAH一5一TER及pAH-R—TER植物表达载体，保存于大肠杆菌DHl0B中。 2．获得转基因植株：利用花粉管通道法，将表达载体导入小麦新品种“周 麦18”，获得了To代种子。通过对To代植株的PPT抗性筛选及PcR鉴定，获得 了转基因植株。 3．生理特性和抗性鉴定：在拔节期，将转基因植株、未转基因植株，进 行白粉菌抗性比较(室内鉴定)；在抽穗期，接种白粉菌的条件下对保护酶系统 进行测定。结果表明，其转基因植株的表现不一致，部分株系抗性提高2—3级。 关键词：弛“眠忍肋脚基因，植物表达载体，花粉管通道，转基因植株，抗 病性 Abstract mildewisa diseaSe me Po、Ⅳdery seVerc血ngalin、Vheat，which greatlyimpacts and machenjsmstLldieson diseaseresistaIlce productiVityquality．Molecular plant new for djseaseresjstallce resist蛐ce op即a pa廿1wayplant improVement．Dise嬲e related and in disease gencs，patllogenesisproteingcneskeysi印algenesplaIlt ailn resistancereactionbe sitestobe for disease may engilleeringreglllatedplant resis协nce encodesa encodesaMAPl(inaseHnase receptor-likekm船e，勋上Z幔J kill船e(MAPKKK)， bom be membersin ofwheatdise鹊eresistallcer％ction． maykey si印alp利1、vay T1lis waS the studyto吲叫ateexpressionsof砒R足aIld而EDR，by biological for wheat mildewresistance．Theresul乜are eng协eeringimpmVillg powdery listitlg as follo、ving：