一氧化氮合酶对脑损伤后神经细胞凋亡影响.pdf

塑趔盘堂2QQ§屋在亟生遮亟±堂焦迨塞 氢焦氢佥煎越照撮鱼质挫墅麴胞塑亡的壁蛔 一氧化氮合酶对脑损伤后神经细胞凋亡的影响 研究生高广伟 推荐导师王明臣教授安玉会教授 郑州大学基础医学院生物化学教研室450052 摘要 bmin 【研究背景】创伤性脑损伤(Traumatic inju啦TBI)后存在着原发和继发两种病理 改变。目前的研究认为，凋亡是引起TBI后继发性脑损伤的重要原因。脑组织损伤后， 神经细胞内会出现凋亡和抗凋亡信号的激活，从而调节神经细胞的凋亡过程。Fas和 Bcl．2均参与了这一过程。Fas可以促进脑损伤后神经细胞的凋亡，而Bcl一2在脑损伤后 的抗凋亡过程中起了重要的作用。此外，脑损伤后神经细胞的损伤与NO肘0s系统有着 oxide 密切的关系。NO又称内皮舒张因子，其生成需要一氧化氮合酶(nitric s”thase， nitricoxide nitricoxide synthaSe，cNOS)和诱生型NOS(inducible NOs，eNOs)。研究 神经型NOs(neuronalNOs，nNOs)和内皮型N0s(endothelial 表明，NO与神经细胞的凋亡有密切的关系，但是不同的NOS对脑损伤后神经细胞凋亡 的影响及其与Bd．2、Fas的关系还不能确定。 【目的】探讨脑损伤后，nNOS和iNOS对神经细胞凋亡的影响及其相关机制。 【方法】330只大鼠随机分成以下五组：正常对照组、假手术组、脑创伤组、7一NI 个时相组，每个时相组及正常对照组均为10只大鼠。采用Ma肌arou法制造大鼠重型弥 漫性颅脑创伤模型，运用HE染色法观察了脑损伤后大鼠海马cAl区损伤情况，并运用 原位末端标记TUNEL法和免疫组织化学法，观察了各组大鼠脑损伤后的不同时相点， 海马cAl区的神经细胞凋亡情况和Bcl一2、Fas的表达情况。 【结果】1、脑创伤组于伤后6小时，镜下可见大鼠海马cAl区出现散在变性坏死神经 元，并于伤后72h加重，并观察到广泛水肿及神经元变性坏死改变，与Marmarou所描 述的模型表现大致相符。2、在正常对照组和假手术组，大鼠海马cAl区偶见TuNEL 阳性凋亡细胞；在脑创伤组、7．NI组以及AG组，伤后各时相点大鼠海马CAl区均出 现TUNEL阳性凋亡细胞，随时间推移，凋亡细胞数呈现先上升后下降的趋势；同脑创 —————————————————————————————————————————————————’——一————————————————、 塑刖盔堂2业§屡在驱空埴醚±堂焦建童 筮些盈盒醒越齄熊馋蜃谴丝塑照迥圭鲤碰喧 的凋亡细胞数明显下降(P0．05)，7一NI组和AG组的其余各时相点的凋亡细胞数目无 胞；在脑创伤组、7一NI组以及AG组，伤后各时相点犬鼠海马CAl区均出现Bcl．2阳性 细胞，随时蒯推移，Bcl．2阳性细胞数目呈现先上升后下降的趋势；同脑创伤组相比， 以及AG组，伤后各时相点大鼠海马CAl区均出现Fas阳性细胞，随时间推移，Fas阳 性细胞数呈现先上升后下降的趋势；同脑创伤组相比，7一NI组各时相点的Fas阳性细胞 Fas阳性细胞数明显下降(PO．05)，其余各时相点无明显变化(PO．05)。 【结论】1、在脑损伤的早期，nNOs能够通过抑制Bcl．2的表达来促进神经细胞的凋亡。 2、在脑损伤的晚期，iNOS可以通过诱导Fas的表达促进神经细胞的凋亡。 【关键