细胞因子与心功能及细胞凋亡相关蛋白关系临床与试验研究.pdf

细胞因子与心功能及细胞凋亡相关蛋白关系 的临床与试验研究 摘 要 背景与目的：充血性心力衰竭(简称：心衰，CHF)是十分常见的临床 综合征，其临床特点是心室功能进行性减退和血液动力学紊乱。目前认为 心衰的形成与多种因素参与有关，最近细胞因子网络激活在心衰中的作用 成为新的热点，许多研究表明细胞因子在心衰的发病过程中起着重要作用。 本研究以细胞因子为主要观察指标，从临床研究方面探讨细胞因子(TNF— a、IL．61与心功能分级的关系，观察不同病因及心功能好转后患者细胞因 子水平变化。试验研究方面检测心衰时心肌组织表达TNF．Q、Bel-2与Bax 的情况，证实心衰时心脏是TNF．a的来源之一，探讨TNF．a与细胞凋亡 相关蛋白(Bcl．2与Bax)的关系。 方法：!逝庭堑塞选择不同病因心衰患者57例和健康正常体检者20 例，采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测心衰患者治疗前后和健康体检 者血中TNF·a和IL-6水平。塞验殛塞将成年Wistar大鼠随机分为心衰 组(建立心肌梗塞后心衰模型)、假术组、治疗组(以福辛普利8mg／kg／日加 入饲料中喂养)，饲养三月后活杀取心肌组织，免疫组化检测以上三组心肌 组织表达TNF．a、Bcl．2、Bax蛋白，Westernblot定量检测三组心肌组织 TNF．a表达量，图象分析半定量检测三组心肌组织Bcl．2、Bax表达量， 相关分析TNF．a与Bax／Bcl．2比值的关系，光镜与电镜下观察组织细胞的 病理变化。 结果：临床研究1．所有心衰患者血清TNF．a和IL．6水平均明显高于 对照组(P0．01)，且中重度心衰组明显高于轻中度心衰组(PO．01)。2．不 同病因心衰患者血清TNF．O和IL-6水平无显著差异(PO．05)。3．经临床 V 治疗心功能改善后，中重度心衰组患者血清TNF．Q和IL．6水平明显降低 (P0．05)。实验研究：1．心衰组、治疗组大鼠与假术组相比，前两组动物 死亡率较高，以心衰组死亡率最高。2．心衰组血液动力学状况明显较假术 组差(P0．01)，治疗组血液动力学状况较心衰组有所改善(PO．05)。3．免 疫组化示三组心肌组织均有不同程度表达TNF．a、Bcl．2和Bax，主要表 blot定量检测三组心肌组织1NF．a表达 达部位位于心肌细胞。4．Western 量，心衰组和治疗组明显高于假术组(Po．01)，其中以心衰组最高(P O．01)。5．图像分析半定量检测Bcl．2和Bax，结果示心衰组和治疗组表达 量明显高于假术组(PO．01)，其中Bax升高程度较Bcl．2更加明显。6．相 0．01)。7．光镜下心衰组心肌细胞局灶性坏死，被纤维组织代替，间质增 生，炎性细胞浸润。假术组心肌细胞排列整齐，连接紧密，结构完整。治 疗组病理变化较心衰组轻。电镜下心衰组心肌组织肌原纤维灶性溶解，坏 死，线粒体肿胀，嵴断裂。假术组肌原纤维排列整齐，肌小节清晰，线粒 体形态正常，嵴存在。治疗组上述病理改变程度较心衰组轻。7 结论：1．心衰时细胞因子(TNF．o与IL-6)水平升高，与·国衰严重程度成 正比，心功能好转后细胞因子水平下降，提示上述细胞因子可作为检测心 功能的指标。2．细胞因子水平与心衰的原发病因无关。3．心衰时心肌组织 表达TNF．Q，表明心脏本身是TNF．o的重要来源，提示TNF．a可能通过 自分泌方式发挥效应。4．心衰时心肌组织表达细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和 Bax的量显著升高，且Bax／Bcl．2比值升高，与TNF．a呈显著正相关，提 示TNF．o可能通过调节Bax／Bcl．2致细胞凋亡。 关键词：充血性，心力衰竭 肿瘤坏死因子．o 自细胞介素．6 Bcl．2BaX The andclinicalofthe experimentalstudy between andcardiacfunction relationship cytokines or myocardial apoptosisrelatingp