一个弥漫性掌跖角化病家系KRT1基因突变检测及突变体功能分析.pdfVIP

摘要 弥漫性掌跖角化病是一组手掌和足趾发生过度角化的常染色体显 性遗传病，现有研究认为该疾病与三个基因相关：定位在12q13的角 角蛋白是表皮内最主要的结构蛋白。并且在维持角质细胞形态中起到 重要作用，该基因缺陷会导致遗传性皮肤病。我们在本室收集的一个 常染色体显性弥漫性掌跖角化病家系中检测到KRTI基因的突变 L437P，并对其突变后导致的功能变化进行了初步研究。 第一章对一个常染色体显性弥漫性掌跖角化病家系的候选致 病基因进行突变检测 现有研究表明，常染色体显性弥漫性掌跖角化病由KRTl基因、 KRTl6基因和KRT9基因的突变所致。我们对本室收集的一个常染色 体显性弥漫性掌跖角化病家系进行上述三个侯选基因的突变检测，通 过PCR和直接测序，在KRl1基因中发现了一个错义突变T1310C， 导致第437位亮氨酸突变为脯氨酸L437P，该突变与疾病表型共分离， 在60个家系外的正常对照中未发现该变异。因此，我们推测KRTl 基因的L437P突变可能是导致该家系发生弥漫性掌跖角化病的原因。 第二章KRTl基因突变体的构建和表达分析 为了探明我们发现的KRTI基因L437P突变与疾病的关系，我们 成重组质粒，转染HaCat细胞后用激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的 绿色荧光表达，野生型的KRTl的过表达在细胞中呈现出规则的网状 结构，L437P突变体的过表达则在细胞中显示出不规则的网状结构 和弥漫性的颗粒样聚集。由此我们推测KRTl基因L437P突变扰乱了 角蛋白中间丝的正常网状结构，从而导致该家系发生弥漫性掌跖角化 病。 关键词弥漫性掌跖角化病，gaiT／，突变检测，L437P突变，突变体 ABSTRACT ·Diffuse keratoderma anAutosomal palmoplantar pPPK)is Dominantinheritance atcllromosome17 disease，to date，歙T9,K．R／／6 andKRT／atc11romosome12havebeen withDPPK． reportedassociating Keratinisthemost structure in important expressedepidermis， protein andthe will defectofkeratinevokes disease． genetic geneticderrnatogic Wehadcollectedafamiliewithdiffuse and keratoderma palmoplantar mutation cloneditsmutationandthenstudiedthe applied detection；we functionofthemutant． ThefirstsectionMutation an detectionofcandidatein genes AutosomalD