分子印迹固相萃取-高效液相色谱法测定饲料中莱克多巴胺.pdfVIP

第 1期 黄 怡，等：分子印迹固相萃取一高效液相色谱法测定饲料中莱克多巴胺 ·57· 莱克多巴胺 (ractopamine，RAC)是一种 一受 盐酸莱克多 巴胺对照 品(含量 ≥98．5％，德 国 体激动剂类药物 ，可促进动物体内脂肪向蛋 白质转 Dr．Ehrenstorfer公 司)；丙烯酰胺 (acrylamide， 化 ，表现出营养再分配效应 。美国食品药 品管理局 AM，分析纯；上海润捷化学试剂有 限公司)；4一乙烯 (FDA)于 1999年允许该药品作为兽药在猪饲料添 吡啶 (4-vinylpyridine，4-VP)、2-乙烯 吡 啶 (2一 加剂 中使用 ，随后南美和亚洲一些国家和地 区也批 vinylpyridine，2-VP)及 乙二醇二 甲基 丙烯酸酯 准使用 。但 由于其潜在 的毒副作用 ，该药物在欧 (ethyleneglycoldimethacrylate，EGDMA)均购 自 洲一些国家 尚未批准使用 ，我国也严禁在畜牧业生 美国Sigma—Aldrich公司，使用前用活性炭吸附去 产中使用各种 一兴奋剂类药物 。随着近年来克伦 除阻聚剂 ；偶氮 二异丁腈 (azobisisobutyronitrile， 特罗检测方法的成熟与监测力度不断加大 ，RAC已 AIBN)、乙腈和甲酸均为色谱纯 ；甲醇 、二氯 甲烷、乙 成为 目前非法使用最为严重的 一受体激动剂之一 ， 酸乙酯 、高氯酸、戊烷磺酸钠等试剂均为分析纯 (广 被称为 “第二代瘦 肉精”。RAC在动物饲料 中的蓄 州化学试剂有限公司)；实验用水为去离子水。 意添加会通过饮食给人类健康带来潜在威胁 ，因此 1．2 分子印迹聚合物的制备 建立一种快速、高选择性 、重现性好的分析方法用于 1．2．1 不 同致孔剂 的MIPs的制备 监测饲料 中RAC具有重要的实际意义。 分别将 1．0mmolRAC溶解于6mL乙腈一三乙 目前 ，有关动物组织 、尿液等基质中RAC残 留 胺体系、丙酮一三乙胺体系、甲醇一三乙胺体系与氯仿一 的检测方法较多 ，但饲料中RAC的检测方法较 甲醇．三乙胺体系 中，加入 4．0mmol丙烯酰胺 (或 少 ，主要有高效液相色谱法 (HPLC) ’、气相色谱一 4一VP及 2一VP)，超声混合 5min，然后加入 20．0 质谱法 和液相色谱一串联质谱法 。这些分析方 mmolEGDMA和30．0mgAIBN，超声5min，于冰 法和标准为动物组织 、尿液 、牛奶及饲料等试样 中 浴上吹高纯氮气 2min，密封 ，置于恒温振荡水浴锅 RAC筛选及确证分析提供 了可靠依据。但这些分 中，在 60℃下聚合反应 24h，得到块状聚合物。将 析方法 的前处理一般都采用传统 的固相萃取小柱 聚合物磨碎 、过筛 ，收集200～400目之间的颗粒 (粒 (如 C mixed—modecationexchange(MCX)等) 径为 38．5～74 m)，用 甲醇反复沉 降以除去细小 净化 ，缺乏选择性 ，特异性不强 ，导致大量基质共萃 颗粒。然后分别装入 200mm ×15mm玻璃柱 ，用 取而影响 目标分析物 的测定 。分子 印迹 固相萃 甲醇一乙酸 (9：1，v／v)溶液洗涤去除模板 ，再用甲醇 取 (molecularlyimprintedsolid—phaseextraction， 洗去乙酸，真空干燥 12h，备用 。 MISPE)是近十年快速发展起来 的用于样品前处理 1．2．2 非 印迹聚合物 的制备 净化的高选择性新技术 ，已成功应用于多个领域复 非 印迹 聚 合物 (non-imprintedpolymers， 杂基质中目标化合物的分离 、净化和富集 。本