- 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
2
LKB1 (Thr336)磷酸化多克隆抗体的制备及在细胞中表达的检测
摘要
PJS 综合症是一种遗传性肿瘤综合症,该病患者患肿瘤的几率增加。致病基
因编码的核定位激酶LKB1 作为肿瘤抑制子在发挥作用,但是LKB1 在细胞中调
控的机制及生理基础都不清楚。研究表明 LKB1 在细胞中被磷酸化并且 Thr336
磷酸化位点在LKB1 抑制细胞生长中起到重要的作用。为了研究LKB1 在不同细胞
中的表达规律及其对细胞增殖的抑制功能,本实验通过生物信息学方法选取
LKB1 Thr336 位点附近 10 个氨基酸且使Thr336 位点磷酸化,并铰链上BSA,以
此为抗原,对兔子进行免疫,制备的抗血清通过Western blot 检测抗体效价,
并用LKB1 抗体和p-LKB1(Thr336)抗体分别对人正常肝脏细胞HL7702、人胚肾细
胞 HEK293、小鼠肉瘤细胞 S180、非洲绿猴肾细胞 COS7 及人结肠癌细胞 Caco2
检测。结果显示,LKB1 抗体不仅识别 His-LKB1 蛋白而且识别 p-LKB1(Thr336)
肽段,而p-LKB1(Thr336)抗体仅识别p-LKB1(Thr336)抗原;且在正常细胞及肿
瘤细胞中 LKB1 和 p-LKB1(Thr336)表达量有差异,在增殖越快的细胞中,
p-LKB1(Thr336)表达量越高。
关键词: LKB1; 磷酸化多克隆抗体; 免疫印迹法; 生物信息学
3
Abstract
Peutz±Jeghers syndrome is an inherited cancer syndrome, which
results in a greatly increased risk of developing tumours in those affected.
The causative gene encodes a nuclear-localized protein kinase, termed
LKB1, which is predicted to function as a tumour suppressor. The
mechanism by which LKB1 is regulated in cells is not known, and nor
have any of its physiological substrates been identified. Recent studies
have demonstrated that LKB1 is phosphorylated in cells and Its Thr336
phosphorylation site play an important role in cell growth
inhibition. To study the expression and the suppression to cell
proliferation of LKB1 in different cells, the LKB1 Thr336 was
phosphorylated and the neighboring 10-amino acid region was
chosen to hinge on a BSA through Bioinformatics methods. Then
the constructed peptide was used as antigen to immunize rabbits
and antibody titer was performed by anti-serum western
您可能关注的文档
最近下载
- 成考英语成人高考(专升本)试卷与参考答案(2025年).docx VIP
- 风机吊装工程强制性条文执行记录表.pdf VIP
- 《营销视觉》课件.ppt VIP
- (高清版)B-T 41676-2022 起重机 设计通则 锻钢吊钩的极限状态和能力验证.pdf VIP
- 181587_06j403-1楼梯、栏杆、栏板(一)国标 行业图集 .docx VIP
- 无人智慧巡检系统设计方案.docx
- 护肩挡土墙施工技术交底.pdf VIP
- 2025年会计师事务所财务管理制度(3篇).docx VIP
- DB11T 2325-2024 建筑外墙外保温工程检验检测技术规程.docx VIP
- 土方碾压实验报告.pdf VIP
文档评论(0)