真菌寡聚糖的制备分析及对葡萄采后诱导抗病的研究.docVIP

真菌寡聚糖的制备分析及对葡萄采后诱导抗病的研究 摘 要 来源于真菌和植物的寡聚糖在调节植物生长、发育及诱导植物抗病性方面，有着重要的作用。本研究从葡萄主要致病菌灰霉和链格孢的细胞壁中提取了寡聚糖，对寡聚糖进行了单糖组成分析，并以红地球葡萄为试材，就寡聚糖对葡萄的诱导抗病性进行了初步研究，为单糖组成分析和生物诱导抗病的应用提供了理论基础和借鉴，开启了果蔬采后保鲜的新思路。 试验对葡萄灰霉的深层培养条件进行了研究，得出葡萄灰霉深层培养的最佳培养 基配方为：葡萄糖3%，土豆汁4%，硝酸钾0.1%，磷酸二氢钾0.1%，硫酸镁0.05%。优化培养条件为：温度26℃，装液量100ml，pH值5.5，摇床转速120r/min。 用大豆子叶法对几种诱导剂的诱抗活性进行了测定和比较，发现两种寡聚糖均具有诱抗活性，不同浓度处理存在诱抗活性峰值，峰值浓度为1000μg/mL。 葡萄致病菌灰霉和链格孢细胞壁中提取的结果显示，主要成分为糖和蛋白质。灰霉中中性糖含量为954μg/mL，占细胞壁重量的24.92%；还原糖含量为8.039μg/mL，占细胞壁重量的0.21%；蛋白质含量为564μg/mL，占细胞壁重量的20.01%。链格孢中中性糖含量为830μg/mL，占细胞壁重量的21.68%；还原糖含量为4.977μg/mL，占细胞壁重量的0.13%；蛋白质含量为533μg/mL，占细胞壁重量的18.91%。 对寡聚糖单糖组成分析中，用PMP对单糖进行柱前衍生，经高效液相色谱（HPLC）分析，发现链格孢寡聚糖中有果糖、D-甘露糖、葡萄糖、D-半乳糖和D-阿拉伯糖五种单糖，五种单糖的摩尔比为3:5:10:4:1；灰霉寡聚糖中有果糖、D-甘露糖、葡萄糖、D-半乳糖和D-阿拉伯糖五种单糖，五种单糖的摩尔比为1:5:3:2:2。 用两种寡聚糖对葡萄果粒诱导处理后接菌，试验结果表明，果实病斑直径和发病率均低于对照，链格孢寡聚糖处理效果要优于灰霉寡聚糖处理。 对葡萄采后诱导抗病相关酶活性的测定结果表明，寡聚糖处理不同程度地诱导了葡萄果皮和果梗中的PAL、POD和PPO的活性，其中灰霉寡聚糖处理优于链格孢寡聚糖处理。 关键词：葡萄；真菌；寡聚糖；高效液相色谱；诱导抗病 the preparation, Analysis and inducedresistance to grapes of Oligosaccharides ABSTRACT Oligosaccharides derived from epiphyte play an important part in regulating plants’ growth, development and induced resistance. In the research, oligosaccharides are derived from cell wall of Alternaria alternate and Botrytis Cinerea which are the main pathogen found on the grapes and the monosaccharides in the oligosaccharides has been analyzed. Aso I have researched the resistance to red earth grapes using the oligosaccharides. The research has provided the way to analyze the monosaccharides in the oligosaccharides and enriched the base theory. The fermentation conditions and medium optimization are taken on in the experiment. The best composition of the fermentation medium is as follows: glucose 3%, potato juice 4%, KNO3 0.1%, KH2PO4 0.1%, MgSO4·7H2O. The improving formation conditions contain: Temperature 26℃, liquid medium quantity 100mL, pH 5.5, waving bed’s rotate speed 120 r/min. The biological activity of the oligosaccharides is measured by using soy c