水稻半胱氨酸蛋白酶OsCP2的功能研究.pdfVIP

摘要 半胱氨酸蛋白酶是植物体中重要的蛋白水解酶，广泛参与种子萌发、幼茵发育、胁迫响应、 组织分化和衰老等生理过程。目前对于半胱氨酸蛋白酶在水稻花药发育过程中的作用及分子机制 研究得并不清楚。通过对野生型和雄性不育突变体tapetumdegeneration 的比较，找剑了表达下调的j卜胱氨酸蛋白酶基因伽CP2。通过RT．PCR以及GUS染色法分析， 发现OsCP2从花药发育的空泡花粉时期剑成熟花粉时期进行表达；原位杂交结果也证明OsCP2 只特异表达于水稻花药绒毡层以及小孢子之中。生化实验显示OsCP2不能够参与由H202诱导的 现阳性植株花药与野生型相比均呈淡黄色甚至白色：碘染、半薄切片实验证实两种转基因花药均 育性下降并且表型异常。免疫共沉淀及凝胶阻滞实验也证实OsCP2可能为受TDR直接调控的下 游基因。 以上结果说明，作为一个半胱氨酸蛋白酶，OsCP2可能在水稻花药发育过程中扮演了重要的 角色。这些结果也为其他农作物雄性不育的研究奠定了良好的基础。 关键词：水稻，花药，绒毡层，半胱氨酸蛋白酶，细胞程序性死亡 Il Abstract