质粒R144drd3对于大肠杆菌DNA复制发动突变型dnaP18的非整合抑制.pdfVIP

遗 传 学 报， 11(3);171-178,1984 Acta Genetica Sinica 质粒R144drd3对于大肠杆菌DNA复制 发动突变型 dnaP18的非整合抑制 杨国深 王文华 沈仁权 盛祖嘉 （复旦大学遗传学研究所，上海） 通过接合转移，把F1,F11,P,W,X,I型的1“种质粒分别引入大肠杆菌复制发动突变型 dnaP18，发现只有I型质粒R14；对于 dnaP18具有抑制作用，消阻遏质粒 R144drd3的抑 制能力高于质粒R144约一万倍而达到完全的抑制。以下事实说明R144drd3并不通过整合 到dnaP18细菌的染色体上而带来对于 dnaP18的抑制：(I)dnaP18(RI44drd3）细菌的染色 体标记的转移频率在10-7以下，而其质粒标记K1nR的转移频率约10-1;(2）这些菌株的DNA 抽提物的电泳图谱和电子显微镜照相都说明质粒 DNA 的存在。 用带有质粒 R144drd3的 E.co“作为供体，用E.coltdnaP18菌株作为受体，通过噬菌 体 P1转导得到的两种 Knz“转导子中一种能在42℃形成菌落，而另一种则不能；将转座子 Tn10转座到R144drd3上以后，同样使受体成为能在42℃形成菌落或不能形成菌落两类。这 些结果表明，质粒 R144drd3上存在着与 dnaP18抑制有关的特定区域或基因。 DNA复制过程可以划分为发动和链延长两个阶段，而以复制的发动为它的中心环 节；发动在机制上独立于链延长，并表现为复制子的特异性。大肠杆菌中已经发现的发动 突变型有 dnaA,dnaC,dnal,dnaP等，延长突变型有 dnaB,dnaE.,dnaG等。 某些质粒的存在可以抑制某些复制突变型，表现为原来在限制性温度 如（420C）不能 形成菌落的突变型变为在42℃能形成菌落。 到现在为止所报道的质粒对于发动突变型 如 dnaA的抑制都属于整合抑制[211，即质粒整合到染色体上，取代了染色体的复制发动功 能，从而使它能在42℃形成菌落；对于延长突变型，如dnaB的抑制则属于非整合抑制18〔) 即质粒并不通过整合，而是以它的某些基因产物补偿突变型的缺陷，从而使它能在420C 形成菌落。本文报道对于复制发动突变型dnaP18的非整合抑制。 材 料 和 方 法 一（）菌种、质粒和噬菌体 实验所采用的大肠杆菌 K12的衍生株及质粒，列于 表1和表2,,Plvir噬菌体用于转导实验。If2噬菌体用于I型质粒的存在及I型菌毛产 生的检侧。 二（）培养基与药品 X．完全培养基 蛋白陈1务、酵母膏0.5务,NaCl0.5外、葡萄糖0.2多、pH7.2- 7.3。用作固体培养基时加人琼脂2外。蛋白陈是日本营养株式会社产品，酵母膏是上海 本文于1983年5月21日收到。 1.72 遗 传 学 报 11卷 表1 本实验采用的菌株 Table1 Strainsusedinthepresentexperiments 菌 株 遗 传 标 记 参考文献 Strain Genetic marker Reference KY2901 dnaP18thrthihismetirpthylaemalxylmtlaraionA Yurat093 azi.firF- FD20011） nala其它同KY2901 本文 Thispaper FD20021》