玉米花粉单倍体植株染色体上异染色质的变异.pdfVIP

遗传学报，18(3):235238,1991 ActaGeneticaSinica 玉米花粉单倍体植株染色体上异染色质的变异 ‘ 谷明光 林 侠 中（国科学院遗传研究所，北京100101) 我们用 GiemsaBSGC一带技术检查了玉米花药培养获得的花粉单倍体植株根尖细胞染 色体上异染色质的变异，观察结果表明，有的植株所显示的 C-带数目是与供体植株的相一 致，有的植株所显示的c一带数目则发生了显著变化，其中有的增加，有的减少。并讨论了异染 色质发生变异的可能原因。还相应地观察到间期核中染色中心的变化是与中期染色体上C- 带数目的变化相一致。 关键词 玉米花粉单倍体植株，染色体，异染色质带，变异 GiemsaC一带显带技术是确定植物染色体上异染色质位置的有效方法。用这种染色 技术处理玉米，仅染色体上的异染色质区染色很深，对这种染色的负反应表明异染色质缺 乏。Ward和 FIoxmeJIbHbIX19用这一染色技术研究了玉米的染色体，观察到在根尖细 胞有丝分裂中期染色体上的GiemsaC一带是与减数分裂粗线期染色体上的异染色质结相 一致。玉米染色体上的异染色质特征可以用来识别每一条染色体和进行核型分析。每一 个玉米变种的染色体上异染色质的染色深度、大小、位置和分布都具有很高的遗传稳定 性，这是很重要的遗传标记。因此，染色体上的异染色质曾经被用来作为识别玉米种族和 变种亲缘关系的可靠细胞学标记。在间期核中大的染色中心的数目是与中期染色体上的 GiemsaC一带数目相一致。最近几年，在植物体细胞培养中染色体上异染色质的变异已 有报道[2,［51。 我们的实验室所获得的试验结果指出，由于长期继代培养的影响，虽然玉 米花粉胚性细胞系的染色体数目仍保持稳定，但是在某些染色体上的异染色质发生了变 异。，。在本研究中我们利用GiemsaBSGC一带技术，观察了玉米花粉单倍体植株之问染 色体上异染色质的变化。其主要结果如下： 材 料 和 方 法 供试材料为 “京黄 13”花药培养的花粉单倍体植株。 切取生长旺盛的根尖，在5℃低温中预处理20小时，在酒精：冰醋酸(3:1v/v）固定 液中固定12--24小时，保存在冰箱中备用。 制片前根尖用1多纤维素酶液在室温下软化处理20-3。分钟，用常规的醋酸洋红法 压片，用干冰或液氮冰冻法将盖片与载片分离开，制片在室温下空气千燥至少3天。之后 制片在60℃的饱和氢氧化钡液 5（多WZV）中处理1小时，用蒸馏水冲洗5-10分p!b. 本文于1989年斗月14日收到。 ．国家自然科学基因资助课题。 236 遗 传 学 报 is卷 人2XSSCpl-I为6.8的溶液中，在00℃下处理1-2小时，蒸馏水冲洗5-10分钟。在 新鲜的Giemsa染液中 p（H6.8)在室温下染色20-40分钟。经过染色的制片用蒸馏水 洗，空气干燥，放入二甲苯巾过夜后用 Euparal胶封片。 结 果 与 讨 论 用 GiemsaC一带染色技术检查了花药培养的供体植株根尖的大约50个中期分裂相 细胞，其核型分析结果表明，它们的带型是很稳定的，在观察的细胞中每个细胞的10对染 色体有，对显示带纹，它们是第3,4和7对染色体的长臂近末端显带，第9对染色体的 短臂末端和第6对染色体的NOR显带。在植株和细胞之间没有发现带型差异。然而这 些根尖二倍体细胞用常规的醋酸洋红染色，所有的染色体均不显示任何带纹。图版1,6 为常规醋酸洋红染色，图版1,7系图版1,6同一分裂相，为 GiemsaC一带技术染色。 我们检查了花药培养获得的花粉植株，每株随机选择50个单倍体细胞，观察结果表 明，其根尖细胞染色体上的异染色质带是有差异的。 例如，有许多花粉单倍体植株在 GiemsaC一带区分染色下显示的异染色质带型和带数是与供体植株 对（照）相一致。但是 另一些花粉单倍体植株的带型和带数则发生了显著变化，在它们的细胞中染色体上的异 染色质带数目，有的增加，有的减少。 被检查的10株花粉单倍体植株的结果如下： 有5株花粉单倍体植株，在其10条染色体中有5条具有明显的异染