玉米花粉胚和愈伤组织细胞染色体数变异的初步研究.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing) 3(l）： 31-321981 简 玉米花粉胚和愈伤组织细胞染色体数 报 变异的初步研究 黄娇香 郑万珍 关月兰 （中国科学院遗传研究所，北京） 本工作的目的是比较不同玉米材料和同一 液进行水解。 因花粉胚和愈伤组织质地较硬， 品种用不同的激素水平和秋水仙素处理，以观 水解时间需长达30-45分钟。 察玉米花粉胚和愈伤组织细胞染色体数目结构 4．媒染：用4 铁矾媒染半小时左右。 和行为的变化。 5．染色：用 0.5务苏木精液染色 2-3小 时。 材 料 和 方 法 6．压片：在 45外酷酸中压片，制成涂片， 供试材料有京黄 13,592与来宾白花粉植 用干冰冰冻，Euparal胶封片。 株H3，还有来自广西农学院群单 105胚性细胞 共观察202块花粉胚和愈伤组织，其中有 团。这细胞团是1977年下半年于花药培养诱 分裂相的％块，观察细胞总数698个。 导出的愈伤组织中选择获得的，我们又继代培 养达5-6个月。 结 果 与 讨 论 基本培养基采用玉培。当从玉米花药培养 每一块花粉胚和愈伤组织 中细胞 多种 多 中产生的花粉胚和愈伤组织直径长至 1-2mm 样，生长发育也很不一致。其中有一些细胞较 左右时，即转移到新配制的分化培养基上，随即 大呈弯曲管状、珊瑚状或长方形。细胞内细胞 置于10-13℃冰箱中，不使受潮发霉，可贮藏 质稀少、核小、内部液泡化，细胞容易压散。这 7-10天或1-2不月。待要进行细胞观察时取 样的细胞是衰老细胞，无分裂相。而呈多边形、 出置于26-27℃左右温度中再培养 2-3天。 规则的圆形或卵圆形的细胞，内部细胞质浓厚、 花粉胚和愈伤组织经从低温到高温处理后，细 核大，细胞连结紧密，是分裂旺盛的分生组织 胞分裂旺盛并且比较同步，适于作细胞学检查。 区，分裂相较多。 我们选择质地紧密、愈伤组织外形多皱褶、 一（）玉米不同材料的花粉胚和愈伤组织 色泽乳白或带黄色、细胞分化旺盛的花粉胚和 细胞的染色体数 愈伤组织进行观察。 从表 1可以看出，玉米不同材料的花药接 材料固定染色步骤如下： 种在同样的玉培培养基上所形成的花粉胚和愈 1．预处理： 用0.05-0.1多秋水仙素或饱 伤组织，其细胞中染色体数目不同。京黄 13不U 和对二氯苯处理2--4小时。 预处理在上午 来宾白花培H3的细胞绝大多数是单倍体细胞， 11.00-12.00或下午14.00-15.00进行。 10个染色体的分别达53.0%和40.0外,20个染 2．固定：用卡诺氏液即无水酒精：冰酷酸 色体的仅 19.0多和 11.2%。在 592胚和愈伤组 (3:1)固定。固定时间为8-15小时，然后置于 斗℃中保存。 HuangJiaoxiangetal.:PreliminaryStudyonVa- riationofChromosome NumberofPollen-derived 3。解离：用浓盐酸与酒精 1:1体积的混合 EmbryoidsandCalliinMaize 31 表1 玉米 不同材料 的花 粉胚和愈伤组 织细胞的染 色体数