玉米联会复合体的电镜观察.pdfVIP

遗 传 学 报，17(2);81-85,1990 ActaCeneticaSinica 玉米联会复合体的电镜观察 莫 兵）‘ 施立 明 （中国科学院昆明动物研究所） 以改进的去污剂微铺展技术制备玉米联会复合休标本，硝酸银染色，以光镜和电VII作相继 观察。结果表明，三倍体玉米配对时除形成三价体和出现同源转换及双联会复合体外，还出现 单价体和非同源配对。本文列出了玉米的SC核型，并对联会复合体侧轴加厚的数 目、分布形 式作了措述。 关键词：去污剂微铺展，联会复合体，玉米 联会复合体 S（ynaptonemalComplex,SC）是 MosesL15，和 FawcettE，在一些动物精 一丹细炮中发现的一种核内非永久性细胞器。其基本结构是由两条平行的侧轴和一条中轴 以及横丝所组成。其主要化学成分是微管蛋白或微管相关蛋白[I]。已知 SC与减数分裂 前期同源染色体的联会和遗传交换有密切的关系。 1959年 Chardard在瘤管兰属植物 (OncidiumSplendidum）中也发现有类似的结构73〔0嗣后，植物 SC的研究也开始有了 长足的进展。以往 SC的研究多采用电镜超薄切片的三维重组技术。由于方法的繁复费 时，SC结构、功能以及行为的深人研究，特别是在遗传育种实践中的应用就受到很大的 限制。近年来，随着界面铺张、硝酸银染色技术的改进和应用，SC的研究开始进人蓬勃 发展的新阶段。Gilles6[1,Stack[191,Albini等E4，分别对植物 SC标本的制备技术作了 新的重大改进和发展0Albini等(3，的微量去污剂铺展方法已成功地应用于黑麦[a]，三 倍体AlliumSpherocephalon[]，四倍体AllinmVineale[141,四倍体一粒小麦，，，洋葱和大 葱们〔，并取得了富有意义的新结果。但这些工作都没有发表可用于核型分析的晚粗线期 SCs照片。看来，现有的去污剂铺展方法和悬浮液成分尚有进一步改进的必要。我们以玉 米为材料，研制了一种比较简单易行的 SC标本制备方法。排列出了玉米 SC核型图，并 对玉米 SC的结构、侧轴加厚以及三倍体玉米的配对特征等进行了详细的观察和分析。 材 料 和 方 法 （一）材料 普通二倍体玉米来自昆明郊区农田。同源三倍体玉米 （品系013-9X品系56-4）由河 南农业大学玉米研究所陈伟程先生慷慨赠送。 二（）方法 从新鲜小花中取出一枚花药，以2%醋酸地衣红压片镜检。如确定该花药处于偶线 期／双线期，则将余下的花药在解剖镜下用解剖针挤出内容物，于1”培养基 （内含0.3外 本文于 1988年 7月7日收到。 1)现在工作单位：中科院成都生物研究所一室。 E2 遗 传 学 报 17卷 ～一 一 ～ 一 ．．．白．．．．叫．．．．，．叫．．．．侧－‘～－～一一一． EDTA,pH一8.2）中制成细胞悬浮液。然后将1滴细胞悬液置于涂有塑料膜 (0.5务 Falcon塑料培养皿碎片的氯仿溶液）的载片上。滴加0.35龙门牌去污粉 （昆明合成洗 涤剂厂出品）水溶液，室温下处理5-10分钟。再滴加6-10滴4%多聚甲醛固定液 (pH 一8.2-9),37℃固定4-6小时。水洗、晾干。然后按Howell和Black方法以硝酸 银染色Cio3。待整张片子呈金黄色时，光镜检查。若有分散良好、对比清晰的SCs，便水洗、 晾干。然后在洁净水面漂取塑料膜。再将膜置培养皿中，在光镜下安放单目铜网，捞片。干 燥后在日立H-300型透射电镜下 7（5kV）观察、拍照。 结 果 与 讨 论 一（）去污剂微铺展技术制备植物SC标本以及光镜和电镜柜练合的观察方法 与Counce和Mayer的界面铺张法比较，去污剂铺展法只需少许低密度的细胞悬液 便足以制备大量分散良好、形态清晰的SCs, 因而特别适用于难以获得高密度细胞悬液 豹植物材料。与 StacVIi9)的压片、低渗法相比，去污剂铺展法免除了去盖片步骤，