正常骨髓细胞的分化与SCE值.pdfVIP

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遗传 13r:RED1lAS(Beijing) 。(4):30一321986 正常骨髓细胞的分化与SCE值” 冯宝章 雷健玲 曹三星2) (中国医学科学院血液学研究所,天津) 有关 SCE 率变化的生物学意义至今仍不 (四)srdU 标记的骨髓细胞的光分解作 明了,尽管有人认为不均等 SCE可能导致基 用 因的扩增111],但 SCE变化是否与细胞的增殖 按时取 BrdU标记过的小鼠骨髓细胞,用 和分化有关,现仍不清楚。 总结应用 BrdU- RPMI1640培养液制成细胞悬液 2(4万/ml),分 SCE方法十多年来的工作 “一2)‘,特别是我们自 成两组在37℃下培养,分别照光与不照光,每 己工作的结果L]-3),我们得出一个印象: SCE 隔1小时取骨髓细胞作胎盘蓝染色,计数死、活 率上升代表细胞的转化11[2]而 SCE率下降则 细胞数。 可能代表细胞的分化和成熟.。为了进一步证实 五()经光分解作用的小鼠骨髓细胞之脾 细胞分化、成熟与 SCE下降的相关,本文应用 集落形成能力测定 3种不同剂量的BrdU活体注射的方法,观察 1.按上述方法将小鼠骨髓细胞标记并作光 了小鼠骨髓细胞的 SCE水平,并结合小鼠脾 分解。每隔 15分钟取骨髓细胞作死、活细胞计 集落实验和光分解效应进行了研究。 数。 2.昆明种成年小鼠20只 (体重 20-25g), 材 料 与 方 法 分成4组,每组5只。实验前2-3小时用“CO- 一()实验动物体内SCE方法 Y线照射850拉德 (致死剂量)。 将上述经光 取本所动物房正常615纯系小鼠30只,体 分解的细胞悬液由尾静脉注射,每只0.2m1,约 重 18-22g。共分为3组:第一组21只,每只 4.8万/只。9天后处死小鼠,取脾,苦味酸甲醛 给BrdU (Sigma产品)18mg;第二组5只,每 固定,24小时后计数脾集落数,求每组小鼠中 只给 BrdU9mg;第三组4只,每只给 BrdU 的平均值。 4.5mg。 共分9次腹腔注射 BrdU水溶液 (10 mg/ml),每只分别注射0.2,0.1和0.05m1, 结 果 与 讨 论 二()骨髓染色体标本的制备 一()不同BrdU 剂A与 SCE率及细胞 取下小鼠股骨并剪去两端的骨髓,用注射 周期动力学变化 器吸 Iml2沁 的柠檬酸钠溶液将骨髓冲人离心 在我们的实验条件下,小鼠骨髓细胞分裂 管,加人0.075MKCl4ml,370C水溶中低渗15 指数为 6.7-6.9瓜,随机观察 100个中期分裂 分钟。常规气干制片,紫外光照射加 2XSSC 相,计算 Mi,M2和 M,细胞的百分数 (CK 溶液温育,以显示SCDo 值)。 大多数小鼠根据 30个第二周期细胞的 三()骨髓有核细胞分类与SCE值 FengBuozhangetccl.:TheDifferentiationofBo- 5只注射过 18mgBrdU 的小鼠,同一只鼠 neMarrow Cellsand Their SCE Values 一侧股骨骨髓制备染色体标本,另一侧作骨髓 1)感谢吴昊教授对本文的指导和审阅;感谢本所姜学英、 细胞涂片,瑞氏染色,油镜观察细胞形态,并作 郭志鸿二同志在实验技术上的协助。 2)山西省肿瘤研究所。 有核细抱分类。

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