一个BMD家系中DXS 164缺失突变的分析.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing)13(2)12-141991 一个BMD家系中DXS164缺失突变的分析＊ 张志平 黄 鹰 张丽珊 鲁晓暄 高翼之 王世渡 南（京铁道医学院生物学教研室，214009) 用DXS164探针在一例 BMD家系中发现有缺失突变。这一缺失跨越了pERT87-1至pERT87- 15区域，缺失片段至少在50kb以上。用 DMD基因内部的J--Bir和 DMD基因两侧的C7和754探 针确定缺失片段位于DXS164。本文还对这一家系中一正常男性可能存在754片段的重复进行了探 讨 。 关键词：X一连锁肌营养不良症，基因缺失，基因重复 Duchenne肌营养不 良 D（uchennemu- 肌原性损害，肌活检可见部分横纹肌萎缩，患者 sculardystrophy,DMD）基因是目前已知的人 舅父也患同样病症，已亡 （图1)0临床诊断为 类最大基因6]〔，长约2000kb左右，定位于Xp21， Becke：肌营养不良。 此家系由南京铁道医学 包含60个外显子。在这样大的区域里基因突变 院附属医院儿科单毓芬医师提供。 频率是相当高的，常引起致死性 的Duchenne 肌营养不 良和 Becker肌营养不 良 B（ecker musculardystrophy,BMD)Monaco，等于 1985年用 pERT87探针首次发现 DMD基因 缺失并将缺失定位在DXS164。用这一位点的 DMD基因组探针可 以在10多的DMD或 BMD患者的这一区域发现缺失，但缺失大小与 此病的临床表现无明显的平行关系。研究表 图1 息者家系图 明，DMD基因突变方式起码有 ”多为基因缺 表1 DMD 基因探针资料表 失或基因重排，且大部分突变的位置在 DMD 441,因的中间区域。pERT87探针正位于 DMD 国．．娜州 基因的中央，此探针所能检侧到的缺失频率相 对较高。 1986年 Koenig等人“,2,5，克隆出DMD基 因全长14kb的cDNA，从而使系统地分析和 PPPppABUUURTCCC3S2I22l112535kkkl5bbbkb1b////HHFK;/KpcpnnoniiRnddlHIIl1IISIIanidllIll 研究 DMD基因成为可能，直接分析 DMD基 因某一区域，可以更加精细地确定DMD基因 探针 探针资料见表1opERT87和J- Bi：探针由美国哈佛大学波士顿儿童医院Kun- 突变的位置。 kel博士提供。C7由法国化学生物学研究所 材 料 和 方 法 ZhangZhipingetal.:AnalysisofDXS164De- 家系资料 先证者孙XX，男，18岁，江 letioninaFamilywithBeckerMuscular1)}r- 苏省沐阳县人。有典型的Becker肌营养不良 strophy 本课题获江苏省科委的资助。 病史和体征，血清CPK明显升高，肌电图显示 本文于 1990年3月12日收到。 hlandel博士提供。754由荷兰 Leiden大学人 类遗传学系Pearson博士提供。 方法 取 ACD抗凝的外周血经NH,C1 破红细胞后，用酚抽提 DNA，限制性内切酶酶 切 DNA样品，0.8多琼脂糖凝胶电泳20-24 小时，依不同材料要求以Southernblotting法 分别转移到Hybond-N,GeneScreenPlus和 硝酸纤维素膜上。 质粒经扩增后用碱法提取， 用限制酶切击插人片段，经凝胶电泳后 以透 析袋回收探针。用 。-31p-dATP通过Nick- translation法标记探针。 杂交采用650C体系 (6XSS