光谱法研究苯丙氨酸二肽与ct-DNA的相互作用.pdfVIP

500 全国第十四届大环化学暨第六届超分子化学学术研讨会论文专辑 光谱法研究苯丙氨酸二肽与ct．DNA的相互作用 吕名秀1，赵东欣1，卢奎1，2‘ 1河南工业大学 化学化工学院，郑州(450001) 2河南工程学院，郑州(451191) 摘要：利用紫外吸收光谱、荧光光谱研究了苯丙氨酸二肽与小牛胸腺DNA之间的相互 作用．在苯丙氨酸二肽的存在下，DNA的紫外吸收光谱呈现明显的增色效应，DNA．EB的 荧光强度显著猝灭，且其最大发射峰发生蓝移．结果表明，苯丙氨酸二肽与DNA之问主 要以嵌插方式相结合． 关键词：苯丙氨酸二肽；小牛胸腺DNA；相互作用 小肽是生命体内的基本配体，是涉及生物体内各种细胞功能的生物活性物质，可以调 节体内各个系统和细胞的生理功能，激活体内有关酶系，促进中间代谢的遇透性，或是通 过控制DNA转录或影响特异的蛋白合成，最终产生特定的生理效应，发挥其药理作用。 DNA是生物体的重要组成物质，遗传信息的携带者和基因表达的物质基础。它在生物 的生长、发育和繁殖等活动中具有十分重要的作用。DNA是所有生物遗传信息的主要载体， 任何一个生物体细胞都具有发育成完整生物全套遗传信息。研究小肽与DNA相互作用ll捌， 一方面可以从分子水平上了解生命现象的本质，开发新型多肽类药物；另一方面可以作为 靶向分子研究其与DNA作用的模式和机理及生物活性之间的关系。本课题组已成功合成 分离出苯丙氨酸二肽p，4】，本文在此基础上利用紫外光谱法、荧光光谱法及黏度法等手段， 研究了苯丙氨酸二肽与小牛胸腺DNA的相互作用，并探索了其作用模式及作用位点。 1．实验部分 1．1仪器与试剂 21傅立叶 、Ⅻ锄公司)，TU．1810紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器公司)，IR．PreStige 变换红外光谱仪(日本岛津公司)，B州br 司)。 mol·L．1 Tris-HCl 小牛胸腺DNA(ct．DNA)(B．R．，Sigma公司)，直接溶于pH=7．0的0．05 锭(EB(A．R．，Sigma公司)；苯丙氨酸二肽(实验室合成)，其余试剂均为分析纯，实验用水 为二次蒸馏水。 1．2实验方法 1．2．1 Uv．V虹光谱测定 于一系列10mL比色管中，固定ct-DNA的浓度。一定量的Phe．Phe溶液，其加入量 合均匀，37℃下放置lh，以相应的二肽溶液作参比，进行紫外光谱扫描。 1．2．2荧光光谱测定 第44卷专辑 西北师范大学学报(自然科学版) 50l moI·L．1)， 于一系列10mL比色管中，在DNA．EB体系中(cDNA-1．0×10弓moI·L～，c髓=1．0xlO‘6 释至刻度，摇匀，37℃下放置lh，测定其荧光发射光谱(屁x=260衄，狭缝(带宽)Ex=Em =5啪)。 1．2．3黏度测定 于一系列25 浓度，其Rt值：O，O．2，0．4，0．6，0．8，1．0，于37℃下放置lh，然后置于乌氏黏度计中在 (30士班1)℃的恒温水浴槽中测量，测定溶液通过毛细管所用时间t(s)。 2．结果与讨论 2．1Phe-Phe与ct．DNA相互作用的紫外光谱 渊A在260姗处紫外吸收呈增色效应。增色效应和减色效应是DNA特有的与其双螺旋 结构密切相关的光谱性质12】。增色效应是DNA中碱基与小分子的配位作用导致DNA双螺 旋结构改变的结果：减色效应则是DNA的磷酸基团与小分子静电作用导致DNA分子发生 空间轴向收缩，引起构象变化的结果。由此初步推测Phe．Phe与ct．DNA的碱基发生了相 互作用。 2．2 Phe．Phe与DNA．EB相互作用的荧光光谱 EB共轭平面分子，本身荧光很弱，嵌入到双螺旋内部的碱基对后可使DNA荧光显著 增强。当EB从双螺旋中出来或双螺旋减少时，荧光强度会显著降低，因而EB可作为