新生鼠高氧肺损伤的体视学研究.pdfVIP

新生鼠高氧肺损伤的体视学研究 北京大学第一医院儿科(100034)冯琪张瑾 【纂要】目的采建体视学憋谚究方法，探讨j#特异性金属基质蛋白酶(挞醵隐)挪穰剡多菠琴素对亳氧赫援伤麟形态 学的影响及其可能的保护作用。方法新生SD大鼠生后12h内随机分为四组：空气+生理盐水组(AN)，空气+多两环索 组(AD)，高氧+生瑾盐承缀(傩)，离氧+多舀环索维(∞)。赛氧指大鬣子嬲氧气条静下饲养。多置繇素缝每天翠 结果高裁及多西环素均导致平均肺泡面积增加，14dOD组星体积高于同期ON组。除ON组矫，各缀肺泡间隔均逐渐增 厚，氧气翻域药物均增棚赫泡阕隔霉发，且掺耀持续。单纯蹇氧馊黠闯度胶原含囊骥显增加；慧氧会势药物晕期胶暇增加 明显，14d及以后胶原含黛降低并与对照组相避。结论高氧及多西环素影响肺发育，多西环素应用可减少高筑导致的肺间 覆申狡原激铡增翻，餐开始籍药孵露、裁量及疗程应迸一步详估。 高氧肺损伤孛鲍肺阂质纤维化秘堰窆肺泡简单化，其中，金属基质蛋白酶，金属蛋白酶组织抑制因子 多西环素燕菲特异性M．MP$撵簏荆，本文研究早鬻应耀多瑟环素对高氧霪毒损伤发生、发展酶影确，探 讨MMPs／TIMPs在高氧肺损伤中的作用及针对此机制干预的可行性。 材料和方法 一、实验动物及分维 高氯+生理盐水缰(◇N)，高氧+多谣环素组(0矜)。 2．高氧肺损伤模型的制作：高氧组(ON、OD组)新生鼠出生12h内置入有机玻璃箱中，维持箱内 氧浓度≥90％。高氧组每日早晚(8am，8pro)各开箱门一次，喂药或对照溶剂，称体重，添加永及镯料， 更换垫料，并予每日早晨与空气组互换姆鼠，以避兔母鼠因氧中毒致嚏乳、护理能力下降。每次开辕lh， 关箱后开风扇O．5h混匀箱内气体，使氧浓度达稳态，≥90％。 (江苏省黄海药业有限公司)【4】，药物溶解于擞理盐水中，最终药物溶解体积为2mg／ml，喂药至实验日或 生后14d。对照组(AN、ON组)接受等量生瑾盐水霄管灌入。． 4．实验时闻：空气组及高氧组分组完毕后即暴露于相应环境下。模型条件下，分别于1、3、7、14 及21d随机选取8只动物，腹腔注射过童戊巴比妥钠(150mg／kg)处死，进行标本采集及研究。 三、赫组织标本采集及铡备 结扎右肺门处取下右肺(共网叶)，将两下叶浸泡于大于10倍体积的4％多聚甲醛液中固定，以梯度 乙醇顺净脱水，二甲苯透明后石蜡包埋，4inn淳度切片，用预先以APES处理酶载玻片捞片，烘干。切片 HE及Masson兰色法染色，进行肺泡、间质、胶原的体视学研究。 四、体视学研究方法 BX 1．设备及方法：图像采集使用Olympus ～1141— 染色切片，每张切片按z字裂选取6个视野，尽量避免选取出现较大血管或较大支气管的视野，图片保存 于计算机，多功能真彩色病理图像分析系统(北京航空航天大学图像中心，版本4。O)进符分析。制作由9 个均匀分布的测试点和上下2条1101am长的水平测试线组成的测试框供研究使用。 2。体视学参数：平均肺泡瑟积(Aa)：单位视野面积上所有膝泡酶平均匿积；赫淹数密发(》黾)： PE)：=4x(Aa) 单位视野丽积上的肺泡个数，数值越大，单位面积内肺泡越多；肺泡形状因予(Form 妃2，是摇述肺泡形状的指标，数值越接近l，表示其形状越接近于圆形；肺泡闻隔厚度(“)：单位视野 面积上测试线完整截取的肺泡间隔的垂直截距；星体积(V卑)：是一个反映连续不艇则结构局部大小的体 视学参数。测试点落入肺泡的水平截距(La)立方乘以n／3，即为V素的无偏估计；胶原面积占肺间质丽积 匿分吃：Masson染色焉蓝色胶原占总闻痰瑟积酶比例。 五、统计学分析 应爝SPSSl0．0统计软件进行统计学处理，组闻院较采焉单因素方差分析和，检验，两组间比较采用 t检验。P0．05为差异有统计学意义。 结 果 除OD21天组因死亡较多、仅4只存活外，其余各组均为8只。 一、平均嬲泡面载(Aa) 不同时间点同一组间比较：各组Aa均