Treg联合imDC诱导大鼠肝移植免疫耐受的实验研究.pdfVIP

福建医科大学 2008 级硕士研究生论文 Treg联合imDC诱导大鼠肝移植免疫耐受的实验研究 摘 要 目 的 探讨受体大鼠脾脏来源的Treg联合供体大鼠骨髓来源的imDC诱导大鼠同种 异体原位肝移植免疫耐受的能力。 方 法 DA→Lewis 大鼠同种异体原位肝移植 100 例，分 5 组：急排组、mDC 组、imDC 组、Treg 组、imDC+ Treg 组（共输入组）；分别于移植前 5d 给 Lewis 大鼠尾静 脉注射 mDC 、imDC、Treg、Treg+imDC 细胞（细胞数：mDC 2×106 个、imDC 2×106 个、Treg 1x107 个），于肝移植术后 3d、7d、10d 各处死 4 只，观察大鼠肝移植术 后外周血肝功能（ALT 和 TBIL ）、血清细胞因子水平（IL-2、IL-10 、TGF- β）、 移植肝急性排斥反应（RAI 评分）、移植肝汇管区淋巴细胞凋亡的改变，分析各 实验组大鼠生存时间。 结 果 肝功能检测表明：imDC 组、Treg 组和共输入组移植后 3d、7d、10d 的肝功 能优于急排组和mDC组，其中Treg与imDC共输入组肝移植大鼠术后ALT及TBIL 升高程度低，恢复时间快。 ELISA 检测表明：肝移植术后 7d Treg 与 imDC 共输入组外周血 IL-10 浓度 高于急排组、mDC组、Treg组，但与imDC组相比差异无统计学意义（P0.05）； 其外周血TGF-β浓度高于急排组、mDC组、imDC组，但与Treg组相比差异无统 计学意义（P0.05）；其外周血 IL-2 浓度低于急排组、mDC 组，但与 imDC 组和 Treg组相比虽然浓度偏低，但无统计学差异（P0.05）。 急性排斥反应评分表明：Treg与imDC共输入组大鼠肝移植术后仅有较少量 的单核细胞浸润，RAI 评分 1～5 分，属非确定型急性排斥反应到轻度急性排斥 反应，术后10d开始出现肝细胞再生，有少量的中性粒细胞浸润。mDC组大鼠肝 移植术后 3 天就出现轻度急性排斥反应，7d 后出现重度排斥反应，较急排组出 2 福建医科大学 2008 级硕士研究生论文 现早，且程度重。而 Treg 组和 imDC 组大鼠肝移植术 7d 后才开始出现轻度排斥 反应，10d后Treg组出现重度度排斥反应，imDC组仅出现中度排斥反应。 TUNEL染色表明：急排组和mDC组大鼠肝移植后肝脏组织汇管区仅有少量淋 巴细胞凋亡，imDC组和Treg组肝脏组织汇管区淋巴细胞凋亡数量高于mDC组， 但低于共输入组,共输入组肝脏汇管区淋巴细胞凋亡数量最多。同时，在大鼠肝 移植术后3d、7d、10d中，mDC组汇管区淋巴细胞凋亡逐渐消失，而共输入组的 汇管区淋巴细胞凋亡数量逐渐递增。 肝移植术后生存时间观察表明：共输入组出现较长存活时间的大鼠，中位生 存时间为 37 天，长于 imDC（23d）组和 Treg（15d）（P0.05）。Treg 组中位 生存时间与 imDC 组差异有统计学意义（P=0.003），imDC 组生存时间长于 Treg 组。 结 论 imDC、Treg 单独输入均未能诱导同种异体大鼠肝移植长期存活；Treg联合 imDC 诱导同种异体大鼠肝移植免疫耐受的能力显著增强，可显著延长同种异体 肝移植大鼠的生存时间。 关键词 树突状细胞 调节性 T 细胞 免疫耐受 大鼠肝移植 急性排斥反应 3