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摘 要
球孢白僵菌对环境温度变化的响应，是影响其孢子制剂对田间害虫防治效果稳定
性的关键因素之一。本研究开展了球孢白僵菌抗逆相关基因BbAGTl编码的0【．葡萄糖
苷转运蛋白的功能分析，并对该菌热激响应相关基因进行了分离筛选，主要结果如下：
克隆了BbAGTl基因，该基因全长1883
bp，含四个外显子和三个内含子，编码565
个氨基酸，编码蛋白的预测分子量为63．65
转运蛋白家族的底物结合位点，与21种已知真菌的0【．葡萄糖苷转运蛋白的同源性高
达90％99％。通过根癌农杆菌介导的真菌转化方法构建使该基因缺失的敲除菌株，经
PCR及Somhem杂交鉴定后进行表型分析。结果显示，同野生株相比，基因敲除株
抗氧化、耐48。C高温胁迫、耐UV．B紫外辐射的能力以及对蚜虫的毒力分别下降27％、
程中起到了重要的作用。
球孢白僵茵热激响应基因的筛选采用抑制消减杂交技术构建Bb2860菌株热胁
迫下的差异表达eDNA文库，从中筛选出28个热激响应上调基因。通过比对分析，
大部分基因与已知功能基因如物质运输、基础代谢及胁迫响应类基因具高度同源性。
运用荧光实时定量PCR测定其中的12个基因在40。C热激15、30、60、120min后的
相对表达水平，发现这些基因的表达模式各不相同，并都随热激时间而变化。由此说
明，菌体在热激的不同阶段依次启动不同的应激方案来应对热激胁迫。
综上所述，球孢白僵菌BbAGTl基因功能和热激响应基因的分析结果，在一定程
度上深化了球孢白僵菌抗逆机制的认识，为利用抗逆相关功能基因遗传改良菌株、提
高生防真菌制制剂的田间稳定性增加了知识和基因资源贮备。
关键词：昆虫病原真菌；球孢白僵菌；0【．葡萄糖苷转运蛋白；基因克隆；基因敲
除；抗氧化；耐热性；UV．B抗性；毒力；抑制消减杂交；热激响应基因；差异表达
Function ofBeauveriabassiana
Analysis
ldentificaitonofHeatStress
Transporter(BbAGTl)and
Genes
Responsive
Summary
the and
Environmentalstressesarecrucialfactors field of
affecting persistenceefficacy
variousBeauveriabassianaformulations to
againstarthropodpeas．T11isstudysought
thefunctionofB．bassiana toisolate
investigate a-glucosidetransporter(BbAGT1)and
heat-stress meansof subtmctive
responsivegenesby suppression
resultsaresummarizedbelow．
andfunctionalof
Gene BbAGTl．ne
cloning．knockoutanalysis full-lengthgene
fromthe ofa B．bassiana al
BbAG
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