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- 2017-09-03 发布于广东
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基因工程的基本操作程序 主要是编码蛋白质的结构基因 * 思考:转基因抗虫棉的大致培育过程? 一、目的基因的获取 二、基因表达载体的构建 三、将目的基因导入受体细胞 四、目的基因的检测与鉴定 一、目的基因的获取 1、从基因文库中获取目的基因 2、利用PCR技术扩增目的基因 3、化学方法人工合成 获取目的基因常采用的方法: 1、从基因文库中获取目的基因 将含有某种生物不同基因的许多DNA片断,导入到受体菌的群体中,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。 基因文库 基因组文库 部分基因文库 (CDNA文库) 某生物体内全部DNA 许多DNA片段 受体菌群体 1、从基因文库中获取目的基因 限制酶 与运载体连接 导入 基因组文库 某种生物某个时期的mRNA cDNA 反转录 受体菌群体 与运载体连接 导入 部分基因文库 (cDNA文库) 2、利用PCR技术扩增目的基因 聚合酶链式反应,在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。可以获得大量的目的基因。 循环 变性 退火 延伸 二.基因表达载体的构建-----------核心 基因表达载体的构建过程 质粒 DNA分子 限制酶处理 两个切口 获得目的基因 DNA连接酶 重组DNA分子(重组质粒) 同一种 一个切口 两个黏性末端 三、将目的基因导入受体细胞 转化 常用的受体细胞:
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