S100蛋白在兔肝脏缺血再灌注损伤过程中的表达及意义.pdfVIP

山东医药2009年第49卷第 期 · 基础研 究 · S100蛋白在兔肝脏缺血再灌注损伤 过程 中的表达及意义 韩建国 ，夏玉军 (1泰安市中心医院，山东泰安271000；2青岛大学医学院) [摘要】 目的 探讨肝脏缺血再灌注 (HIRI)过程中S100蛋白表达变化及其意义。方法 将21只大白兔随 机分为模型组、对照组和正常组各7只，模型组建立免HIRI模型，对照组手术操作同模型组，但不夹闭门静脉和肝 动脉；正常组不手术。普通 HE染色观察各组肝组织细胞学形态；免疫组织化学方法染色检测各组肝组织细胞 S100蛋白表达情况，并用Sampl-PCI图像分析系统进行半定量分析。结果 模型组肝组织细胞可见大量S100染色 阳性细胞，平均光密度值显著高于对照组和正常组(P0．01)。结论 S100蛋白参与了HIRI过程，其表达升高对 HIR1可能起保护作用，机制尚需进一步探讨。 [关键词] 肝脏；缺血再灌注；S100蛋白 [中图分类号] R333．4 [文献标识码] B [文章编号] 1002—266X(2009)07-0047-03 缺血再灌注损伤 (IRI)是导致肝脏切除后肝功 规石蜡包埋，组织切片，普通HE染色观察肝组织细 能衰竭和肝移植后移植物早期非免疫性失活的重要 胞学形态；用免疫组织化学方法染色显示肝组织细 原因，其过程中有多种细胞因子和化学因子参与，包 胞S100表达情况，以细胞核出现棕黄色染色而胞质 括多基因激活及肝脏微循环多种改变，一般细胞、组 不着色为阳性，并用Sampl—PCI图像分析系统进行 织损伤和修复共存。2008年 1月，我们观察了S100 半定量分析(OD值)。 蛋白在兔肝脏 IRI(HIRI)过程中的表达，并探讨其 1．2．3 统计学方法 所得数据利用SPSSIO．0统计 作用机制。 学软件进行统计学处理，计量资料行t检验，检验水 1 材料与方法 准 =0．05。 1．1 材料 健康纯种新西兰大 白兔21只，雌雄不 2 结果 限；鼠抗兔S100抗体，羊抗兔二抗免疫组化试剂盒； 2．1 肝组织细胞形态学 对照组和正常组肝组织 Sampl—PCI图像分析系统；OLYMPUS显微镜 BXS0 内肝小叶、血窦等结构无明显异常；模型组肝组织血 及 PM-20型 。 管内见大量白细胞黏附于血管壁，有血栓形成，肝索 1．2 方法 紊乱，血管周围组织浊肿变性、可见明显 白细胞浸 1．2．1 动物分组及处理 将21只大白兔随机分为 润。 模型组、对照组和正常组各7只，均适应性喂养 l 2．2 S100蛋 白表达情况 正常组和对照组肝小叶 周。模型组禁食 12h、自由饮水，采用 10％水合氯 周边、肝血窦壁均有少量、染色相对较浅的阳性细胞 醛(0．3ml／100g)腹腔注射麻醉，兔仰卧于术台，固 出现，两组无显著差异。模型组可见大量阳性细胞， 定，消毒，打开腹腔，暴露门静脉和肝动脉，用无损伤 主要位于肝小叶周边、肝血窦壁 (内皮细胞)。模型 动脉夹夹闭系膜门静脉和肝动脉人肝处，无菌生理 组、对照组及正常组 S100蛋 白半定量值分别为 盐水纱布覆盖切 口，旁照灯照射保暖，1h后松开动 0．2264±0．034 1、0．1286±0．0923、0．130 2± 脉夹恢血流，依次关闭切 口。术后分笼饲养。对照 0．0427，模型组显著高于其他两组，P0．01。 组除不夹闭门静脉和肝动脉外，余操作同模型组；正 3 讨论 常组不手术。 ， 许多肝外科手术过程中，尤其是处理广泛肝损 1．2．2 肝组织细胞形态学观察及S100蛋 白表