FAK在雌激素诱导MCF—10A乳腺上皮细胞转化中的表达及其意义.pdfVIP

2376 重庆医学2013年 7月第42卷第2o期 · 基础研究 · FAK在雌激素诱导MCF—IOA乳腺上皮细胞转化中的表达及其意义 杨 莉，李 阳，朱筑霞，王旭 东△ (贵阳医学院生理学教研室 550004) 摘 要 ：目的 观察 17—8雌二醇(E2)诱导雌激素受体 (ER)阴性乳腺上皮细胞 McF_1OA转化及伴随的局部黏着斑激酶 (FAK)表达变化 ，探讨 FAK在细胞转化 中的生物标记意义 。方法 以ER阴性 MCF_1OA细胞为研究模型，E2连续刺激模型细 胞 5周(共传 1l代)建立转化细胞模型，采用蛋 白印迹法检测蛋 白表达变化、软琼脂集落形成实验检测非贴壁依赖集落形成、伤 口 愈合实验检测细胞迁移及细胞胎盼蓝染色计数观察细胞生长。结果 E2连续刺激 MCF_1OA细胞 5周后 ，细胞生长速度 明显增 快、接触抑制性消失，细胞迁移显著增快，同时在软琼脂基质 中形成集落。在 E2诱导细胞转化早期即出现 FAK蛋 白表达增强及 蛋 白剪切 ，但乳腺癌标记分子周期蛋 白E表达无 明显变化。结论 E2诱导 ER阴性 MCF-10A乳腺上皮细胞转化 中始终伴随 FAK表达变化 ，提示 FAK可能成为预测 ER阴性乳腺细胞转化的早期生物标记物 。 关键词：17-8雌二醇；黏着斑激酶；乳腺上皮细胞；细胞转化；生物标记物 doi：10．3969／j．issn．1671-8348．2013．20．025 文献标识码 ：A 文章编号 ：1671-8348(2013)20—2376—02 Altered expression ofFAK in estrogen-transformedM CF-10A mammaryepithelialcellsanditssignificance Yang Li，LiYang ，ZhuZhuxia，Wang Xudong (DepartmentofPhysiology，GuiyangMedicalCollege，Guiyang，Guizhou550004，China) Abstract：Objective Toinvestigate17~-estradiol(E2)一inducedtransformationandcoincidentalteredexpressionoffocaladhe— sionkinase(FAK)inestrogenreceptor(ER)一negativemammaryepithelialcelllineMCF-IOA ．soastounderstandwhetherFAK isa potentialbiomarkerinE2一transformedmammarycells．Methods MCF-10A cellsweretreatedwithE2for5weeks(11passages)to establishanE2一transformedcellmode1．W esternblottingwasusedtoaccessproteinexpression，soft—agarcolonyformationtestwas employedtoobserveanchorage independentgrowth，woundhealingassaywasappliedtoobservecellmigration，andTrypanblue stainingandeellcountingwasemployedtoobserveeel1growth．Results AftertreatmentofwildtypeMCF-IOA cellswithE2for5 weeks，thecellsdisplayedincreasedproliferation，m igration，andcolonyformation，indicatingatransformedphenotype．Moreimpor— tantly，enhancedexpressionandproteolysisofFAK wasnoticedduringtheprogressionofE2一inducedtransformation．Conclusion E