功劳木的抗肿瘤作用及其机制研究.pdfVIP

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摘 要 摘 要 目的:从中药功劳木提取物中筛选具有抗肿瘤作用的活性成分,并探讨活 性成分的抗肿瘤作用机制。 方法:采用MTI(3-(4,5-Dimethythiazol一2一Y 肿瘤活性成分。通过吖啶橙/溴乙啶(Acridine BromideAO/EB) orange/Ethidium 内涵活细胞成像系统检测细胞内氧自由基水平,以检测功劳木活性成分K562 细胞凋亡的影响。提取兔脑微管蛋白采用比浊发检测功劳木活性成分对微管 蛋白聚合一解聚的影响。 结果:从功劳木提取物中筛选出两种抗肿瘤活性成分,分别为药根碱和 小檗碱,其对K562细胞作用48h的IC50分别为30.47 la咖l,15.36IJ咖l。 药根碱、小檗碱作用K562细胞36h后,在形态学上呈现明显的细胞凋亡特征, 且细胞内氧自由基水平明显增加,细胞内线粒体膜电位明显降低,均呈浓度 依赖性。体外兔脑微管蛋白聚合.解聚分析表明,药根碱和小檗碱均能抑制微 管蛋白的聚合,且药根碱作用强于小檗碱。 结论:从功劳木中提取的药根碱和小檗碱对K562细胞生长具有明显的增 殖抑制作用并可诱导其凋亡。药根碱和小檗碱可能通过阻碍线粒体内信号传 导通路或抑制微管蛋白的聚合诱导细胞凋亡。 关键词:功劳木;抗肿瘤;细胞凋亡;微管蛋白 III ABSTRACT ABSTRACT ofmahoniaand ex缸.acttheanti.tumoractiveconstituent Objective:To mechanismsof anti-tumoreffectsontubulin andits investigate polymerization maboniae. inK562cells theanti—tumorofmahoniae Methods:Throughtesting activity MTT tofurtherfindactive usedacridine by assay ingredient.We Bromide methodto orange{EthidiumAO|EB)staining bromide(Acridine cell of examinemorphology,Use daect inmitochondrialmembrane use Hoechst33342 potential,We changes combinedwith fluorescenceof cells DCFH.DA/Hoechst33342 high·content

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