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中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBulletin 2013Aug;29(8):1179—80 。1179 ·
网络 出版 时间:2013—7—1613:46 网络 出版 地址 :http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R1346.032.html
TNF.ot对人脐静脉内皮细胞 ICAM.1和VCAM.1表达的影响
王 健 ,黄午阳 ,郑其升 ,王兴娜 ,李春阳
(1.江苏省农业科院农产品加工研究所,江苏 南京 210014;2.南京农业大学食品科技学院,江苏 南京 210095;
3.江苏省农业科院国家兽用生物制品技术研究中心,江苏 南京 210014)
Effect of TNF.oton expression of ICAM -1 and 抗人 IgG、鼠抗人 B—actin一抗 、鼠抗人 IgG(博士德公司),蛋
VCAM .1inHUVEC 白裂解液(碧云天公司)。
1.2 方法
WANG Jian ,HUANG wu—yang,ZHENG Qi—
1.2.1 细胞培养、传代H 新生胎儿脐带用 I型胶原酶消
sheng ,WANG Xing—na ,LIChun-yang
化,M199完全培养基于37%,5%CO2培养得一代 HUVEC;
(1.InstituteofFarm ProductProcessing,JiangsuAcademyof
胰酶消化传代。
AgriculturalScience,Nanjing 210014,China;2.Collegeof
1.2.2 样品制备 TNF一浓度为0、1、5、10、20、30 g·LI1
FoodScienceandTechnology,NaajingAgriculturalUniversity,
刺激4h;随即用最佳浓度的TNF一0【分别刺激 0、1、2、4、6、8
Nanfing 210095。China:3.NationalTechnicalResearchCentre
h,得到样品细胞。
ofVeterinaryBiologicalProducts,JiangsuAcademyofAgricul—
1.2.3 ELISA法测定细胞上清可溶性 ICAM.1、VCAM一1蛋
turalScience,Nanfing 210014,China)
白含量 博士德 ELISA试剂盒测定细胞上清,酶标仪450
doi:10.3969/j.issn.1001—1978.2013.08.032
nm下测定 OD值。
文献标志码:A 文章编号:1001—1978(2013)08—1179—02
1.2.4 Westernblot测定细胞 中 ICAM一1、VCAM一1蛋 白含量
中国图书分类号:R322.123;R341;R392.12;R364.5;R543
BCA试剂盒测定总蛋 白含量,80V,15min和 120V,45
关键词 :人脐静脉内皮细胞 ;肿瘤坏死 因子;细胞间黏附因
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