枸杞酸性转化酶基因的克隆及组织表达分析.pdfVIP

· 生物技术 · 北方 园艺2014(01)：86～90 枸杞酸性转化酶基因的克隆及组织表达分析 王 丽 娟，赵 辉，王 彦 才，丁 向真，马 建 明 (宁夏大学 生命科学学院，宁夏 银川 750021) 摘 要：以“宁杞 1号”枸杞为试材 ，通过 RT-PCR及 RACE技术进行枸杞酸性转化酶基 因的 克隆及组织表达分析，并运用 MEGA5．0软件对植物转化酶基因进行 了系统树分析。结果表明： 扩增获得 2193bp的枸杞酸性转化酶基因，命名为 LbSA (GenBank：KC776575)，该基因推导氨 基酸序列与马铃薯、番茄、梨等酸性转化酶基 因氨基酸序列同源性为 68 ～100Fo；LbSAJ编码 的蛋白质属于液泡酸性转化酶；Real—timePCR表达分析显示，LbSA，基因在枸杞花中表达量最 高，在根中表达水平较低。 关键词：枸杞；酸性转化酶；基因克隆；表达分析 中图分类号：R282．4 文献标识码 ：A 文章编号：1001～0009(2014)O1--0086—05 宁夏枸杞 (Lyciumbarbarum I．)属茄科枸杞属多年 果、葡萄、网纹甜瓜、草莓、西瓜、桃和柑橘的研究表明，蔗 生落叶灌木，果实称为枸杞子 (Fructuslyii)，核小、鲜红 糖代谢相关酶与果实糖积累之间存在密切联系口]。蔗 色，具有补肾养肝、润肺 明目之效。枸杞素有 “红宝”之 糖是植物同化物运输的主要形式，是体内最重要的一种 称 ，其果、花、叶、皮和根均可人药 ，有很高的营养价值和 糖类。蔗糖为植物提供碳源和能源，首先依赖其裂解形 药用保健功效，不仅是我国传统的名贵中药，也是我国 成己糖 ，这一过程至少受 2类不同酶的催化：1类为蔗糖 的重要经济资源l1]。在世界范围内枸杞有 80多个品种， 合酶 ]，可催化蔗糖裂解为尿苷二磷酸葡萄糖 (I P() 我国有 7个品种，主要分布于西北地区的宁夏、新疆、内 和果糖 ：另 1类为转化酶，催化蔗糖裂解形成葡萄糖和 蒙古、甘肃等。但 以宁夏 中宁栽培 的宁夏枸杞最为 果糖 。 地道。 生理学研究发现酸性转化酶在枸杞果实的糖代谢 蔗糖 、葡萄糖和果糖是植物果实 中主要的可溶性 中起着主要的调控作用，叶片中果糖的含量与酸性转化 糖，其含量对果实品质起着重要作用。近年来人们对苹 酶呈显著正相关 ；果实中葡萄糖和果糖的含量与酸性转 化酶均呈极显著正相关 ，而与其它酶无相关性[6]。随着 第一作者简介：王丽娟(1974一)，女．博士，副教授 ，现主要从事植物 现代化分子生物学及细胞生物学的发展，人们逐步认识 基因工程等研 究工作 。E-mail：Lijuanwang279@hotmail．corn． 到一切生理、生化进程的调控最根本原因是 由基因开闭 基金项 目：国家 自然科学基金资助项 目。 决定的，研究与了解其代谢分子机理，可以为调控代谢、 收稿 日期 ：2O13一O9～1O StudyOilthePlantLna dscapePlanningnadDesignof Henna AgriculturalUniversityNew Campus LISa，SU Fang，TIAN Guo*xing (CollegeofForestry．HenanAgriculturalUniversity，Zhengzhou，Henan450002) Abstract：Inrecent