吖啶橙诱导酪氨酸酶构筑酚类碳毡传感器及电化学行为.pdfVIP

第37卷 第1期 辽 宁科技 大 学 学报 、，0．1．37NO．1 2014年2月 JournalofUniversityofScienceandTechnologyLiaoning Feb．2014 吖啶橙诱导酪氨酸酶构筑酚类碳毡传感器 及电化学行为 张志强，雷 蕾，王 涛，李雨晴，张 楠 ，陈佳慧，宋云飞，王 月 (辽宁科技大学 化学工程学院，辽宁 鞍山 114051) 摘 要：酚类化合物是很多行业的生产废物，其残留对于人类的健康十分不利。因此，对环境中酚类化合物残 留的快速准确地检测十分必要。研究使用酪氨酸酶为生物组分，通过吖啶橙诱导将其吸附在碳毡电极上 ，以环 境污染物邻苯二酚及4．氯苯酚为底物，检测所制备电极的性能。研究表明，吖啶橙能够提高酪氨酸酶碳毡电极 的性能，稳定及提高酪氨酸酶在碳毡电极表面的活性，对邻苯二酚及4-氯苯酚具有很好的检测性能。 关键词：酪氨酸酶；吖啶橙；碳毡；传感器；酚类化合物 中图分类号：O661 文献标识码：A 文章编号：1674．1048(2014)01．0001．05 含大量酚类化合物的工业废水排放到人们的生存环境中，对人们的身体健康构成了极大的威胁 ，对 农林业的可持续发展也很不利。由于缺乏检测数据，在世界范围内，污染的程度还是个未知数…。传统的 检测方法虽然具有高灵敏度，但是仍然存在操作复杂、样品需要预处理、无法实时实地检测等缺点。随着 科技的不断发展，对污染物残留的检测手段和检测水平提出了更高的要求，促进了环境污染物残留快速 检测的研究和应用进展。近年来 ，利用酶的活性来检测酚类化合物残留渐渐成为热点话题。由于该方法 能够实现快速的、在线检测的功能而大大降低了操作成本。 传统的用来检测污染物的酶包括乙酰胆碱酯酶(ACHE)、碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(AP)、酪氨 酸酶乜。等。Huang等使用葡萄糖氧化酶来检测环境水中的除草剂残留情况，实现了高灵敏度的测试H]。 AshokMulChandani等采用有机磷水解酶结合电化学、光学转换器检测有机磷农药，可达到快速、简单、高 效的检测效果b。酪氨酸酶也叫多酚酶，其活性中心含有双核铜 ，具有两个催化氧化循环过程，分别是单 酚酶的催化氧化与双酚酶的催化氧化过程，能够催化氧化单酚和双酚化合物而生成醌类化合物 。由于 其特殊的生物活性，常被用于电流型生物传感器来检测环境中的酚类化合物订。 物理吸附主要通过静电引力将酶附着于电极表面，无需化学试剂，活化和清洗步骤也极少。但所固 定的酶容易从电极表面脱落，同其他固定化技术相比，酶的寿命较短。SatishKumaran等通过物理的吸附 方法将丁酰胆碱酯酶(BuChE)吸附在预先活化的尼龙聚酰胺膜上，并用尼龙网将载有酶的膜片固定在玻 璃pH电极上制备成电位型生物传感器，对土壤中提取的有机磷杀虫剂的残留进行检测 。为了给酶提供 更合适的支撑表面，不同的材料如高分子材料、介孑L材料、碳材料以及近年兴起的纳米材料等被用来作为 生物传感器的电极材料 。 碳毡由碳纤维组成的微电极结构，直径大约为7 1，具有高表面积、高导电性及高电子效率，能够实 现快速的电子传递 ，适合作为工作电极应用于生物电子器件的研究中【。此外，碳毡还具有无序三维结 构以及高孔隙，能够应用于流动注射分析系统，实现在流动介质中对样品进行检测。 收稿 日期 ：2013．06．07。 基金项 目：鞍山市民生科技进步行动计划项 目(201IMSI4)。 作者简介：张志强(1964一)，男，黑龙江哈尔滨人，教授。 辽 宁科 技 大 学 学报 第37卷 使用酪氨酸酶为生物组分，以碳毡为工作电极、本文研究用吖啶橙与酪氨酸酶物理共吸附法固定生 物传感器电极。该方法制备过程简单 ，使用水作为溶剂，对环境无污染，所制备的电极能够对环境中的污 染物邻苯二酚及4．氯苯酚进行高灵敏度的检测，所用碳毡成本低廉，适宜产业化。因此，本文研究对于实 际生产和环境监测具有一定的经济和社会效益。 1 实 验 1．1 仪器与试剂 电化学测量由电化学分析仪(CHI6122，上海辰华有限公司)完成；流动注射实验由双柱塞泵(DMx一 200