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沙棘对大鼠胸腺基因表达谱de影响.pdf

《现代农业科技)2010年第4期 动物科学 沙棘对大鼠胸腺基因表达谱的影响 杨 蒙 (西安职业技术学院生物工程系,陕西西安 710077) 摘要 通过对大鼠胸腺进行基因表达谱分析,评价沙棘对大 鼠胸腺基因表达谱 的影响。结果表 明:与空 白对照组 比较 ,服用沙棘组出 现表达差异基因共 15条,其 中ratio2的上调基 因 11务,而ratio0.5的下调基因4条,涉及免疫细胞 因子、细胞凋亡等相关基 因。可见沙棘 影响了胸腺基因的一 系列表达 ,这些基因的表达可能为从分子水平探讨沙棘促使 T细胞生长提供基础 。 关键词 沙棘 ;大鼠;胸腺 ;基 因表达谱 中圈分类号 Q786 文献标识码 A 文章编号 1o07~5739(201O)O4~o335一O2 EffectofHippophae rhamnoidesL.On Gene Chip Expression Proffiesin ThymusofRat YANGM eng (DepartmentofBiologicalEn~neefing,XianCollegeofCareerandTechnology,XianShaanxi710077) Abstract Thegenechipexpressionprofilesofratthymuswereanahyzed,andtheeffectofHippophaerhamnoidesL.ongenechipexpression profileswasevaluated.Theresultsshowedthatcomparedwiththecontrol,15differentialexpressedgeneswerefoundbetweentestgroups,11geneswith ratioabove2wereup—regulated.4geneswithratiobelow 0,5weredown—regulated,whichwereinvolvedingenesrelatedwithimmnnecellfactorsand cellapoptosis.SothesegeneexpressionprofilesaboutratthymusinducedbyHippophaerhamnodiesL.maybeonemechanismpromotingrgowthofTcel1. Keywords HipophaerhamnoidesL.;rat;thymus;genechipexpressionprofile 基因表达谱芯片 (GeneChip或MicroArray)是采取原位 1.2 胸腺总RNA 的提取 合成或者微点阵的方法将寡核苷酸或cDNA探针固化到基 使用Trizol试剂 (Invitrogen公司)按照试剂使用说明提 片表面 ,通过与标记荧光的样本 mRNA特异性杂交 ,在使用 取胸腺总RNA。 激光共聚焦扫描仪对荧光信号检测来确定 mRNA表达量的 1.3 荧光标记 方法 。基 因表达谱芯片是高通量检测 mRNA表达量 的有效 将每组 40只大 鼠胸腺总 RNA等量混合 ,取 5.51xL混 手段,具有微型化、高集成 、样品mRNA用量小等优点。自从 合的总 RNA(约 5txg)参加反应 ,使用 cRNA扩增与标记试 第 1款基因表达谱芯片问世,就被广泛应用于 mRNA的高 剂盒 (Agilent公司)进行 cRNA制备与标记 。用Cy3标记对 通量检测。 照组胸腺cRNA.用Cy5标记服用沙棘大鼠胸腺 cRNA。 胸腺 (thymus)为机体的重要淋巴器官,其功能与免疫紧 1.4 芯片杂交 密相关

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