枳壳醇提物对大鼠离体胸主动脉环的收缩作用与机制.pdfVIP

枳壳醇提物对大鼠离体胸主动脉环 的收缩作用与机制1 庄须国，潘振伟，刘晓丹，李国玉，牛慧丽，吕延杰，杨宝峰* 哈尔滨医科大学药学院药理学教研室，省部共建生物医药国家重点实验室，哈尔滨 (150081) E-mail ：yangbf@ 摘 要：目的：探讨枳壳醇提物对大鼠离体胸主动脉的收缩作用与机制。方法：制备Wistar 大鼠胸主动脉环，采用离体血管实验方法，经生物信号采集与分析系统测定血管环张力的变 化。结果：枳壳醇提物（FAE ）能够浓度依赖性的提高主动脉环张力，对去除内皮血管环的 最大收缩幅度为74±4.9% ，明显强于对内皮完整血管环的作用44±3.4% （P ﹤0.01 ）。预孵一 氧化氮合酶抑制剂L-NAME （300mmol·L-1 ）后，FAE对内皮完整的血管环的最大收缩幅度明 -5 -1 显提高，达到77±5.3% （P ﹤0.01 ）。在去除内皮的血管环上，维拉帕米（10 mol·L ,VER ） 及无钙液孵育均可明显阻断FAE 的收缩作用，其最大收缩幅度分别降低52±3.8%和49±3.7% （P ﹤0.01 ）；激光扫描共聚焦检测细胞内钙的结果表明，FAE浓度依赖性（0.16g·L-1 、0.32g·L-1 ） 的增加了静息状态平滑肌细胞胞浆内钙浓度。结论：FAE 能够浓度依赖性收缩大鼠胸主动脉， 其作用机制可能与激活血管平滑肌上的电压依赖性钙通道，促使胞外Ca2+ 内流有关；同时， FAE也作用于血管内皮细胞，促进一氧化氮的释放，部分抵消其缩血管作用。 关键词：枳壳醇提物；血管收缩；钙通道；一氧化氮；胸主动脉环；激光扫描共聚焦 中国图书分类号：R-965.2；R 331；R 285.5；R 283.3；R 322.121；R 329.25 枳壳（Fructus Aurantii ）为芸香科柑橘属植物酸橙（Citrus aurantium L. ）及其栽培变种 的干燥未成熟果实，属理气药[1] 。作为临床上经常使用的中药材，枳壳的药理作用主要集中 于胃肠道、心血管、气管平滑肌，抗癌、抗菌抗炎等方面。枳壳能够明显升高麻醉狗和蟾蜍 的血压[2-3]，因此我们推测枳壳具有收缩血管的作用，但枳壳收缩血管的确切机制仍不清楚。 因此，本实验采用离体大鼠胸主动脉环张力测定和激光共聚焦细胞内钙检测方法,观察枳壳 醇提物对血管的直接作用，并初步探讨其机制。 1 材料与方法 1.1 药物与试剂 枳壳醇提物(Fructus Aurantii extraction FAE)制备 取枳壳中药材,82%乙醇溶液微沸提 取两小时，提取两次，合并提取液，旋转蒸发仪回收乙醇，剩余溶液浓缩后烘干，得枳壳醇 提物粉末。 主要试剂 盐酸去氧肾上腺素、维拉帕米购自上海禾丰制药有限公司；L-NAME购自 Sigma公司；其他试剂购自各试剂公司 主要仪器 HV-4血管环灌流系统（成都泰盟科技有限公司）、BL-420生物机能实验系 统（成都泰盟科技有限公司）、JH-2肌张力换能器（北京航天医学工程研究所）。激光扫描共 聚焦显微系统FV-300 (Olympus公司，日本 1.2 动物 1本课题得到基金项目：黑龙江省科技厅攻关项目（GC06C33302 ），高等学校博士学科点专项科研基金资助 课题（20040226041 ）的资助。 - 1 - Wistar大鼠，体重200～250g ，雄性，由哈尔滨医科大学实验动物中心提供。 [4] 1.3 胸主动脉环的制备 Wistar大鼠麻醉后, 迅速取出胸主动脉, 置于 Krebs-Henseleit (K-H )[ 成分(mmol·L-1 ): NaCl 118, KCl 4.7, KH PO 1.2,MgSO