携带535嵌合型fiber的溶瘤腺病毒对胃癌细胞的杀伤能力研究-http.pdfVIP

维普资讯 浙江理工大学学报 ，第 25卷，第 5期，2008年 9月 JournalofZhejiangSci—TechUniversity Vo1．25，No．5，Sept．2008 文章编号：1673—3851(2008)05—0564—05 携带 5／35嵌合型 fiber的溶瘤腺病毒 对 胃癌细胞 的杀伤能力研究 马蕾娜 ，刘 佳 ，钱其军 (浙江理工大学生命科学院，杭州 310018) 摘 要：鉴定 5／35嵌合型溶瘤腺病毒对人 胃癌细胞BGC-823的杀伤能力。使用荧光显微镜观察，流式细胞仪 检测，病毒产量测定和MTT等一系列实验方法对5／35嵌合型溶瘤腺病毒的杀伤能力进行测定。结果表明，与5型 溶瘤腺病毒相 比，5／35嵌合型溶瘤腺病毒表现 出更强的杀伤 胃癌细胞 BG42-823的能力。 关键词：溶瘤腺病毒；胃癌；嵌合型；纤毛蛋 白 中图分类号：Q279 文献标识码：A 0 引 言 胃癌在我国的发病率较高，而 目前对于胃癌的治疗手段有限，因而迫切需要新型的治疗手段 。以病毒 为载体的肿瘤生物治疗已经显示出可喜的治疗效果。其中，人腺病毒足 目前研究最为广泛的应用于肿瘤生 物治疗的医用病毒 。同其他类型的病毒相比，腺病毒具有很多优势。其 中溶瘤腺病毒是一类在肿瘤细胞内 保持较强增殖能力的腺病毒，比传统的复制缺陷型腺病毒的抗癌能力更为出色。 目前溶瘤腺病毒大都以5型腺病毒为基本骨架改造而成，5型腺病毒主要借助科萨奇病毒一腺病毒受 体(Coxsackievirus--adenovirusreceptor，CAR)完成对靶细胞的侵染。但是人们发现 5型腺病毒对某些类 型的肿瘤细胞转染效率很低。如乳腺癌细胞对 5型腺病毒不敏感，这很可能与其表面 CAR表达量较低有 关[1]。许多临床报告显示 5型腺病毒虽然体外实验表现出较高的感染效率，但是在患者体内却不能发挥疗 效。因此，限制了5型溶瘤腺病毒的治疗效果。 与 5型腺病毒不同，35型腺病毒通过其纤毛蛋 白(fiber)与细胞表面的CD46膜蛋 白的结合黏附并进入 细胞[2]。35型腺病毒还能够高效侵染某些肿瘤细胞。如BrouwerE等人[3]使用35型腺病毒改造而成的溶 瘤腺病毒，在对脑癌的治疗中取得 了更高的对肿瘤细胞的感染效率。此外，35型腺病毒还能够逃避机体免 疫系统的识别 。 虽然35型腺病毒能够感染多种 5型腺病毒无法侵染的细胞，并且免疫原性较 5型低，但是由于 目前人 们关于35型腺病毒的认识和研究远不如 5型腺病毒的多，所以直接以35型腺病毒为基本骨架构建溶瘤腺 病毒尚需大量的摸索工作 。 人们开始尝试集合 5型和 35型腺病毒的优点，以5型腺病毒为骨架，改变其 fiber中与感染细胞过程 有关的部位。例如，GaneshS等[构建的携带Relaxin的5／35嵌合型fiber溶瘤腺病毒与5型fiber的对照 收稿 日期：2。O8一O3—24 作者简介：马蕾娜(1983～ )，女，浙江丽水人，硕士研究生，主要从事癌症基因的治疗。 维普资讯 第 5期 马蕾娜等：携带5／35嵌合型fiber的溶瘤腺病毒对胃癌细胞的杀伤能力研究 565 病毒相比，能够明显延长罹患肿瘤的小鼠的存活时间。YuL等_[5又‘发现5／35嵌合型fiber比5型fiber能 更有效的介导腺病毒感染食管癌和 口腔癌细胞。HoffmannD等[=6。J证实带有 5／35嵌合型 fiber的溶瘤腺病 毒具有更为理想的疗效，展现出应用的前景，并证明了这种嵌合型溶瘤腺病毒构建过程 的可行性。以上实 验均证明了5／35嵌合型fiber的溶瘤腺病毒具有比5型 fiber的溶瘤腺病毒更为强大的杀伤能力。 现在对 5／35嵌合型 fiber的研究尚处于起步阶段，虽有文献报道这种外壳蛋 白的改造对实际治疗的影 响，但却没有对 胃癌治疗效果的研究报道。为了检测 5／35嵌合型溶瘤腺病毒对 胃癌的治疗效果，笔者使用 携带 5型 fiber的溶瘤